24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 223  |  回复: 3
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 lijing740303 的 6 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lijing740303

木虫 (小有名气)

[交流] 10金币求助两道考博题

1、一蛋白用SDS聚丙电泳分离后为一条带,请问,这个蛋白是否只有一种成分,如果还有其它成分如何分离,鉴定纯度

2、从cDNA文库中用特定一对引物利用PCR扩增一个酶蛋白基因。将该基因重组到一个通用表达载体上进行表达。对经过纯化的酶蛋白进行活性测定表明,重组蛋白具有相应酶活性。是否可以认为有关蛋白质基因表达纯化工作是否完成?为什么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tsingtao2008

木虫 (著名写手)

地球村村民


lijing740303(金币+1,VIP+0):多谢回答!
第一个问题: 可能不止一种蛋白. 所谓共迁移条带. 2-DE. 色谱
第二个问题: 还应研究增加表达量、提高活性

[ Last edited by tsingtao2008 on 2008-3-4 at 20:49 ]
钱要流动,人要走动
4楼2008-03-04 20:45:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

biocore

★ ★ ★
lijing740303(金币+3,VIP+0):多谢,先给3个金币!
引用回帖:
Originally posted by lijing740303 at 2008-3-3 23:51:
1、一蛋白用SDS聚丙电泳分离后为一条带,请问,这个蛋白是否只有一种成分,如果还有其它成分如何分离,鉴定纯度

2、从cDNA文库中用特定一对引物利用PCR扩增一个酶蛋白基因。将该基因重组到一个通用表达载体上进行 ...

1.不一定,也可能两个蛋白分子量相同,那么一维电泳根据分子量来分离就不行了。
   跑一个二维电泳,就可以,分离了。根据分子量,电荷进行分离。
   鉴定纯度有多种方法,目前常用,且经济的就是HPLC了。

2.不可以,因为,很有可能,你仅仅克隆到,该酶基因的活性部位,可能该活性部位有活性,但在缺少其他部位的时候活性不够。或者,你克隆到了,比该酶基因更大的片段,含有多余的序列。
2楼2008-03-04 08:25:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂:一志愿湖南大学 材料与化工(085600),已过六级。 +7 XX小邓 2026-03-29 7/350 2026-03-30 16:50 by asdfzly
[考研] 26考研-291分-厦门大学(085601)-柔性电子学院材料工程专业求调剂 +4 min3 2026-03-24 5/250 2026-03-30 16:41 by 梨子~
[考研] 11408总分309,一志愿东南大学求调剂,不挑专业 +3 天赋带到THU 2026-03-29 4/200 2026-03-30 16:24 by nihaoar
[考研] 303求调剂 +4 DLkz1314. 2026-03-30 4/200 2026-03-30 16:18 by JourneyLucky
[考研] 0856求调剂 +8 楒桉 2026-03-28 8/400 2026-03-30 10:00 by wzy-lxz
[考研] 317求调剂 +10 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 10/500 2026-03-30 09:45 by longlotian
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +4 邱gl 2026-03-26 7/350 2026-03-30 08:39 by 探123
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-24 6/300 2026-03-29 20:45 by 无际的草原
[考研] 一志愿北京理工大学本科211材料工程294求调剂 +8 mikasa的围巾 2026-03-28 8/400 2026-03-29 12:48 by 无际的草原
[考研] 0856材料化工调剂 总分330 +14 zhubinhao 2026-03-27 14/700 2026-03-29 10:01 by Sjndkwm
[考研] 071000生物学求调剂,初试成绩343 +7 小小甜面团 2026-03-25 7/350 2026-03-28 20:25 by 唐沐儿
[考研] 311(085601)求调剂 +4 liziyeyeye 2026-03-28 4/200 2026-03-28 18:50 by 535743368
[考研] 320分,材料与化工专业,求调剂 +9 一定上岸aaa 2026-03-27 13/650 2026-03-28 15:00 by 神马都不懂
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 305求调剂 +5 哇卢卡库 2026-03-26 5/250 2026-03-27 14:01 by laoshidan
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
信息提示
请填处理意见