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漫向谷

铁虫 (初入文坛)

[求助] 线粒体定位 已有2人参与

各位大神，请问怎样做线粒体GFP定位，求具体方法步骤，我们实验室都做叶绿体定位，线粒体定位还没人做过。
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1楼 2014-04-13 10:11:20
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kueradi

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-04-13 18:20:19
漫向谷: 金币+3, ★★★很有帮助, 有了大概的轮廓，不过还没有我想要的具体的实验步骤，还是谢谢你 2014-04-15 10:11:34
mitotracker可以染线粒体，它是红光，可以看GFP（绿光）是否与红光重合，以确定GFP所融合蛋白是否定位线粒体。或者转mito-Dsred(专门定位线粒体的质粒，发红光)
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2楼2014-04-13 11:03:15
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漫向谷

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kueradi at 2014-04-13 11:03:15
mitotracker可以染线粒体，它是红光，可以看GFP（绿光）是否与红光重合，以确定GFP所融合蛋白是否定位线粒体。或者转mito-Dsred(专门定位线粒体的质粒，发红光)

那侵染洋葱表皮的话，需要提原生质体进行染色吗？还是直接进行染色？
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3楼2014-04-14 17:32:20
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kueradi

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 漫向谷 at 2014-04-14 17:32:20
那侵染洋葱表皮的话，需要提原生质体进行染色吗？还是直接进行染色？...

这个没做过，不知道呀。
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4楼2014-04-16 18:58:54
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金色的鸽子

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 漫向谷 at 2014-04-14 17:32:20
那侵染洋葱表皮的话，需要提原生质体进行染色吗？还是直接进行染色？...

你好  我也要做线粒体的蛋白定位，请问你做的怎么样了？可以用洋葱表皮直接做吗？？
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5楼2014-10-11 11:50:54
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漫向谷

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 金色的鸽子 at 2014-10-11 11:50:54
你好  我也要做线粒体的蛋白定位，请问你做的怎么样了？可以用洋葱表皮直接做吗？？...

我试过两次，导师说用洋葱表皮做线粒体定位，不具可信性
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6楼2014-10-17 09:51:07
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天地一微尘

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-10-18 21:30:38
将一个线粒体蛋白的信号肽片段连在GFP上，表达后可将GFP导向线粒体上。
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7楼2014-10-18 21:26:04
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