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实时定量PCR
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虫友们，大家好，我是个新人，第一次发帖，咨询一下大家关于ABI实时定量的荧光阈值自动取值问题。 我之前看资料说，CT值是从基线到指数增长期的拐点所对应的循环次数，它必须位于指数增长期内。ABI7500的培训说，CT值大于18时，不需要调整基线，但是小于18时，需要调整。以下是我两次实验的结果，是分析的不同基因的表达情况，但是就上述规则而言，最小的CT值是小于18的，所以应该都需要调整。但是我之前也做过几次，发现自动分析的CT值都是低于18的，这是我样品的问题，还是仪器自动取值就是不太靠谱啊？而且，我是检测的转基因植物的过表达情况，发现如果手动调整阈值，对实验结果的影响还是挺大的，有的表达量升高十几倍的，调整之后就没怎么过表达了，所以也不敢随便调整阈值。各位大神，请问你们这种情况是怎么弄的啊？  Amplification Plot.jpg  Amplification Plot-2.jpg |
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xiweijia
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