20楼: Originally posted by luna跃儿弯弯 at 2014-04-15 20:10:38
您好 我想问一下  虽然知道是胞内蛋白 但是我也取上清准备用胞外蛋白来试试看做个对比什么的  上清也经过了沸水煮10分钟这个过程 为什么没有条带出现呢？按理说应该也会有一些胞外蛋白的吧？...

21楼: Originally posted by 穆子涵 at 2014-04-16 09:22:19
你所说的上清是培养基上清还是细胞破裂完之后的上清？如果是培养基上清肯定看不到的，因为量太少，而且体外条件下蛋白不稳定，会很快被降解掉的。你所说的胞外蛋白是指分泌蛋白？我所说的上清是指你破裂完细胞之后 ...

22楼: Originally posted by luna跃儿弯弯 at 2014-04-16 23:03:26
嗯呢，我说的胞外蛋白是指分泌蛋白，还以为发酵液的上清中会有呢…因为我发酵液菌体离心去上清加上样缓冲液沸水煮菌体最后SDS电泳有条带，这说明它是一个胞内蛋白。我开始以为我的上清经过同样的处理也会有条带（但 ...

23楼: Originally posted by luna跃儿弯弯 at 2014-04-16 23:07:14
我要是想证明的话该怎么做呢？如果是发酵液离心，缓冲液悬浮，然后超声破碎细胞，得到的上清应该是粗酶液，还是说明是胞内蛋白吧？
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24楼: Originally posted by 穆子涵 at 2014-04-17 10:19:02
你说的粗酶液中所含的蛋白，一般就认为是包内蛋白了。要是非要证据的话，我觉得你可以用生信方面的数据来说明问题的，比如保守结构域的预测，亲输水性的预测等。。...

10楼: Originally posted by Allen206 at 2014-04-11 15:27:51
表达条件优化下，设置个十八度，转速，诱导剂浓度，有道四小时就够了，不行就是系统不行，换载体和宿主、培养基