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GUS染色液不同配方的问题(好迷茫)
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刚接触农杆菌侵染,共培养之后打算做下GUS检测,在文献中以及网上发现有很多不同的版本,不知道它们之间是怎么回事,所以罗列出几个,希望了解情况的同学能给予解答。 配方一:50ml的体系:10 g/L X-Gluc 5mL ;50 mmol/L亚铁氰化钾 500 微升 ;50 mmol/L 铁氰化钾 500 微升 ; 甲醇 5mL ;0.1% Triton -X100 500 微升 ; 磷酸钠缓冲液 38.5 mL。 配方二:100ml的体系:氯霉素Chloramphenieol 10mg ; lmo/l NaH2P04 5ml ; 10%Triotn 1ml ; 甲醇Mehtanol 20ml ; x一Gluc 88.9ml ; pH7.5 配方三:100 mmol/LmM磷酸钠缓冲液(pH=7.0),0.5 mg/ml X-GluC、1% Triton X-100、1%DMSO、10 mmol/L mM EDTA 配方四:1ml体系:0.5M Na2EDTA 20ul ; trionX-100 1ul ; 1M NaH2PO4 100ul ; 0.1M K3Fe(CN)6 5ul ; 0.1M K4Fe(CN)6 5ul ; 10mg/ml X-Gulc 200ul ; 去离子水 669ul 为什么配方如此之多呢,而且里面的药品差别也比较大。有没有大家比较常用的,效果比较好的推荐呢?还有看到有的文献还分固定液、缓冲液、染色液。但是有的文献只有一种缓冲液或者染色液,这个要区分吗? |
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