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pharmacy_zyl银虫 (初入文坛)
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S 各位群友，我想做有关病毒方面的东西，但是处于起步阶段，所以想找一个比较安全的模型，具有病毒的相似的理化性质，但无致病力，大家有么好建议？ 拜托了，老板催的很急！ |
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lauren180
木虫 (著名写手)
小木虫挖井人
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wuyexu1205
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reasonspare(金币+3,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.. 奖2个, 让你更开心
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现在很常规的干扰素活性检测常用的，水泡性口炎病毒（VSV)。 1、水泡性口炎病毒（VSV)的制备 选9日龄SPF鸡胚,去头、内脏及四肢，用PBS清洗两次，剪碎，加0.25%胰酶，37度水浴消化30分钟，用玻璃珠分散细胞，待组织块沉降，吸出上清液并用铜网过滤，1000rpm离心10分钟，弃上清，向细胞沉淀中加入生长液（含5%新生牛血清的DMEM培养基），计数使细胞浓度在20~30万个细胞/毫升，加生长液10毫升/瓶，置37度,5%CO2培养箱过夜培养，待细胞长成单层接种病毒。用生长液稀释病毒至10-3，弃去原生长液，换入新鲜生长液，同时接种10-3病毒液1毫升，置37度培养至75%以上的细胞产生病变时收集细胞液，反复冻融3次，使细胞破裂释放病毒，混匀，-70度冻存备用。 2、用MDBK传代细胞制备病毒液也可以。方法差不多，比用鸡胚成纤维细胞要方便多了，呵呵。 祝你好运 [ Last edited by michaelmoo on 2008-3-3 at 13:24 ] |
7楼2008-03-03 13:23:03
