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caojinxuan

银虫 (正式写手)

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[求助] 问DNA回收中如何避免溴化乙啶中毒

虽然戴上手套，但溶胶和离心很多操作都有可能将溴化乙啶污染到其他仪器，或者实验室其他地方，成为致使他人中毒的隐患。
请教做过的朋友，你们切胶后如何操作。要注意哪些问题？

没操作经验的希望您不要灌水跟帖，谢谢！

[ Last edited by caojinxuan on 2008-2-27 at 16:52 ]

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累事经年，仰天啸月间情感俱伤纵马横川，剑指远峰处星河灿烂

1楼 2008-02-27 15:43:25

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随风而过

银虫 (小有名气)

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溴化乙锭EB净化和处理方法

溴化乙锭EB净化和处理方法
EB是我们从事生命科学尤其是分子生物学经常要接触的致癌性物质,且不好处理.现提供如下方法,供参考. 特别是刚走进实验室未生育的新同行,一定得学会保护自己呵,否则还涉及到下一代问题
实验室中经常有EB被打翻或EB废弃物的处理问题，如何做到标准处理？

1 严禁随便丢弃。因为EB是强致癌性，而且易挥发，挥发至空气中，危害很大。

2 废 EB溶液的处理方法
(1) 对于EB含量大于0.5mg/ml的溶液，可如下处理：

a. 将EB溶液用水稀释至浓度低于0.5mg/ml；
b. 加入一倍体积的0.5mol/L KMnO4 ，混匀，再加入等量的25mol/L HCl，混匀，置室温数小时；
c. 加入一倍体积的2.5mol/L NaOH，混匀并废弃。

(2) EB含量小于0.5mg/ml的溶液可如下处理：

a. 按1mg/ml的量加入活性炭，不时轻摇混匀，室温放置1小时；
b. 用滤纸过滤并将活性碳与滤纸密封后丢弃。

3 废EB接触物，如抹布，枪头。

一般回收至黑色的玻璃瓶中，定期进行焚烧处理。
由于EB是一种诱变剂，直接倒入水槽或扔进拉圾箱可能会带来危害。所以应该根据情况处理：
1. 电泳胶
胶里面痕量的EB没有问题，如果小于0.1％可以直接扔掉。而如果发红，即大于等于0.1％时应该放在生物危害柜中焚烧掉。
2. EB溶液
<10ug/ml 时可以直接倒入水槽
>10ug/ml 时应该用木炭过滤或化学方法使其失活（推荐用木炭过滤的方法）
溶液中还有重金属、氢化物、硫化物时应该按照危险垃圾处理
化学中和方法：
方法一：加等体积的漂白粉，搅拌4小时，静置4天，用NaOH调至pH4-9, 倒入排水沟的同时用大量水冲。
方法二：每100ml加5％磷酸，加12ml0.5M的NaNO3，搅拌并静置20小时，同上调pH, 倾倒。
3. 手套、设备等物品
放在医用垃圾中焚烧，如污染严重则用漂白剂处理。

EB的净化处理方法
小心：溴化乙锭是强诱变剂，并有中度毒性。取用含有这一燃料的溶液时务必戴上手套。这些溶液使用后应按下面介绍的方法之一进行净化处理。
（一）溴化乙锭浓溶液（即浓度>0.5mg/ml 的溴化乙锭溶液）的净化处理
方法Ⅰ：用沙门氏菌——微粒体测定法表明。本方法可使EB的诱变活性降至原来的1/200 左右。
1）加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/ml以下：
2）在所得的溶液中加入0.2体积的新配制的5%次磷酸和0.12体积的新鲜配置的0.5mol/L亚硝酸钠，小心混匀。切记：检测该溶液的pH值应<3.0，市售次磷酸一般为50%溶液，具有腐蚀性。应小心操作。必须在临用前现用现稀释。亚硝酸钠溶液（0.5mol/L）的配法：用水溶液34.5g亚硝酸钠并定容至终体积500ml，现用现配。
3）于室温温育24小时后，加入大大过量的1mol/L碳酸钠。该溶液可予丢弃。
方法Ⅱ：用沙门氏菌——微粒体测定法检查，经用本方法处理后，可使EB的诱变活性降低至原来的1/3000左右。但也有报告称，在用净化溶液处理的空白样品中，偶尔有一些仍具有诱变活性。
1）加入足量的水使EB的浓度降低至0.5mg/L以下；
2）加入1倍体积的0.5mol/L KMnO4，小心混合后再加入1倍体积的2.5mol/L HCl小心混匀，于室温放置数小时；
3）加入1倍体积的2.5mol/L NaOH小心混合后可丢弃该溶液。
（二）EB稀溶液（如含有0.5ug/ml EB的电泳缓冲液）的净化处理
方法Ⅰ
1）每100ml溶液中加入2.9g Amberlite XAD-16，这是一种非离子型多聚吸附剂，可向Rohm & Haas公司购置；
2）于室温放置12小时，不时摇动；
3）用 Whatman 1号滤纸过滤溶液，丢弃滤液；
4）用塑料袋封装滤纸和Amberlite 树脂，作为有害废物予以丢弃；
方法Ⅱ
1）每100ml溶液中加100mg粉状活性炭；
2）于室温放置1小时，不时摇动；
3）用Whatman 1 号滤纸过滤溶液，丢弃滤液；
4）用塑料袋封装滤纸和活性炭；
注：用次氯酸（漂白剂）处理EB稀释液并不可取； EB在262℃分解，在标准条件进行焚化后不可能再有危害性； Amberlite XAD-16 或活性炭可用于净化被EB污染的物体表面
希望能对你有帮助！