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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 虐我千遍的质粒！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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laqiwe

铁虫 (正式写手)

[求助] 虐我千遍的质粒！！！ 已有6人参与

使用过试剂盒和手提两种方法提质粒，但效果都不好
主要问题有两种：1、拖带严重（如图1）
                            2、条带清晰但存在非目的带，简直是不知道哪里冒出来的（如图2）
       两种极端真是不能忍啊！！！
       对于图2酶切后，条带弥散，目的片段和载体质粒都消失了，有木有！！！
求大神指导~~~

虐我千遍的质粒！！！
1.JPG


虐我千遍的质粒！！！-1
2.JPG
虐我千遍的质粒！！！-2
酶切.JPG



[ Last edited by laqiwe on 2014-3-19 at 19:13 ]
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1楼 2014-03-19 19:11:58
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zhaogan364

新虫 (小有名气)
唉~ 按照说明书来酶切，我用那个quick cut 还挺不错
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对你好，才是真的好，中国好男人。。。
2楼2014-03-19 19:19:02
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, ★有帮助 2014-03-20 09:17:21
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:26:55
亲，你的图放反了。。。。。
粗提质粒的话可以参考《分子克隆实验指南》的碱裂解法等，但是要进行酶切的质粒则应对粗提的质粒进行处理，或者直接采用试剂盒进行精抽，选择合适的量进行酶切
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-03-19 19:38:59
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aotoulan

禁虫 (小有名气)
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, ★有帮助 2014-03-20 09:17:32
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:27:05
本帖内容被屏蔽
4楼2014-03-19 20:34:53
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, ★有帮助 2014-03-20 09:17:39
质粒提取操作要温柔
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做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2014-03-19 22:03:46
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lxy5521046

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, ★有帮助 2014-03-20 09:17:47
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:27:15
要温柔 如何温柔 知道豆腐吧 手上拿块豆腐 颠倒混匀。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-03-19 22:47:38
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laqiwe: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-20 09:18:03
你酶切酶浓度是不是太高，你用少量酶时间短些再看看，第一张片的Marker都拖尾估计你的胶不好电压有些高。
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hehe
7楼2014-03-20 08:24:24
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)
你的问题要解决也不难，需要排除几方面因素，手机打字不方便，电脑上再说。

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-03-20 08:37:09
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
为什么你们照胶都要反着呢？以后发文章也照样处理图片吗？
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9楼2014-03-20 15:05:26
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836277455

新虫 (初入文坛)
所以到底是什么问题，我最近也碰上了...

发自小木虫IOS客户端
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10楼2016-06-13 09:38:31
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