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laqiwe

铁虫 (正式写手)

[求助] 虐我千遍的质粒!!! 已有6人参与

使用过试剂盒和手提两种方法提质粒,但效果都不好
主要问题有两种:1、拖带严重(如图1)
                            2、条带清晰但存在非目的带,简直是不知道哪里冒出来的(如图2)
       两种极端真是不能忍啊!!!
       对于图2酶切后,条带弥散,目的片段和载体质粒都消失了,有木有!!!
求大神指导~~~

虐我千遍的质粒!!!
1.JPG


虐我千遍的质粒!!!-1
2.JPG
虐我千遍的质粒!!!-2
酶切.JPG



[ Last edited by laqiwe on 2014-3-19 at 19:13 ]
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zhaogan364

新虫 (小有名气)

唉~ 按照说明书来酶切,我用那个quick cut 还挺不错
对你好,才是真的好,中国好男人。。。
2楼2014-03-19 19:19:02
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, 有帮助 2014-03-20 09:17:21
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:26:55
亲,你的图放反了。。。。。
粗提质粒的话可以参考《分子克隆实验指南》的碱裂解法等,但是要进行酶切的质粒则应对粗提的质粒进行处理,或者直接采用试剂盒进行精抽,选择合适的量进行酶切
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
3楼2014-03-19 19:38:59
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aotoulan

禁虫 (小有名气)

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, 有帮助 2014-03-20 09:17:32
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:27:05
本帖内容被屏蔽

4楼2014-03-19 20:34:53
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zhaozhibozhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, 有帮助 2014-03-20 09:17:39
质粒提取操作要温柔
做一个阳光、开朗的小和尚
5楼2014-03-19 22:03:46
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lxy5521046

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laqiwe: 金币+1, 有帮助 2014-03-20 09:17:47
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:27:15
要温柔 如何温柔 知道豆腐吧 手上拿块豆腐 颠倒混匀。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2014-03-19 22:47:38
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laqiwe: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-20 09:18:03
你酶切酶浓度是不是太高,你用少量酶时间短些再看看,第一张片的Marker都拖尾估计你的胶不好电压有些高。
hehe
7楼2014-03-20 08:24:24
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

你的问题要解决也不难,需要排除几方面因素,手机打字不方便,电脑上再说。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-03-20 08:37:09
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

为什么你们照胶都要反着呢?以后发文章也照样处理图片吗?
9楼2014-03-20 15:05:26
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836277455

新虫 (初入文坛)

所以到底是什么问题,我最近也碰上了...

发自小木虫IOS客户端
10楼2016-06-13 09:38:31
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