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糖不苦0102

金虫 (初入文坛)

[求助] 【求助】体外全血/ 血浆中稳定性 & 化合物是否结合在血细胞上 已有1人参与

求助:
1. 我正在研究一个新合成化合物,想要测定该化合物的体外全血/ 血浆中的稳定性。 我采用的方法是:将药物加入全血/或血浆中,最终浓度50uM,incubate不同时间 (0, 15, 30, 60, 120 min),然后加入2倍体积的甲醇沉淀蛋白,离心后进样HPLC-UV。结果:血浆组 面积几乎没有降低(60 min之前各组完全没有变化);但是全血组 15 min面积就已经减少90%...
于是我猜测可能原因:1. 化合物被全血中酶代谢? 2. 化合物结合在血细胞上,或者进入到血细胞中?

请问:请大家帮助我分析一下:
1. 全血中化合物面积降低的原因是?
2. 如果想要研究 化合物是否结合在血细胞上,或者进入到血细胞中, 应该怎样设计实验呢?
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莫忘初心
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+2, 鼓励应助 2014-03-19 22:05:15
全血中孵育的时候,设5min和10min两个时间点,看药物的降解百分比是否随时间变化,如果不随时间变化,基本可以排除化合物是被全血中的酶代谢的可能性,有可能是与血细胞的结合造成的。
2楼2014-03-19 20:17:01
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
辣笔v小新: 金币+2, 鼓励应助 2014-03-19 22:05:33
如果想确认是否与血细胞结合,可以在全血中加入药物,然后直接离心,再分别测定上清(血浆)和下层沉淀(血细胞)中的药物的量,应该就可以确定。
3楼2014-03-19 20:20:29
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ningningaaaa

金虫 (正式写手)

楼主在哪弄到的血啊
4楼2014-07-22 10:31:23
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