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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 请问如何用HPLC来测定某一未知样品的纯度？
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xiaohe160

金虫 (正式写手)

[交流] 请问如何用HPLC来测定某一未知样品的纯度？

我现在使用Waters 2996/2695 HPLC， Empower的工作站，测定某一样品中目标成分的纯度（其中目标成分没有标准品，所以不能用常规定量方法来定量）。我的方法是用Empower自带功能Maxplot，此功能可以将色谱3D图在XY平面上投影，绘制出每个色谱峰的最大吸收，将其集中在一张色谱图上显示出来。然后根据目标成分的峰面积的百分比得出其纯度。

     对以上方法的疑问：如果样品中含有紫外吸收弱的杂质，那以上方法的准确程度就会受到质疑。

     请问分析高手是怎么认识这个问题的，谢谢了。

[ Last edited by 佳怡 on 2009-4-24 at 21:27 ]
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1楼 2008-02-16 08:13:19
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dxyzoe

木虫 (正式写手)
有问题的，除非知道各组分的摩尔吸收，有对应关系，而且，还要不能有无紫外吸收的组分，
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7楼2008-02-17 19:42:07
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davidann

木虫 (知名作家)
这样做理论上也是可以的，但是必须知道每个流出组分的响应因子，即单位浓度的组分在你所选定的波长处产生多少吸收，并且样品中所有组分都流出色谱柱，且在检测器上均可得到相应的色谱峰。然后根据Ci%=fiAi/(f1A1+f2A2+f3A3+...+fnAn)算出被测物的浓度。
如果简单的以峰面积百分比算它的浓度实际上是假设每个组分都有相同的响应因子
如果你的样品非常复杂，这样做实际上是不可能完成

最好做液质，得到质谱图知道你要测的组分是个什么物质，先定性。然后看看有没有标准品卖，买不到标准品的情况下还可以用制备型液相色谱提纯物质，再定量
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改革春风吹大地，核心价值牢记心。
3楼2008-02-16 17:51:25
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byron1111

至尊木虫 (正式写手)
目前的配置是不能做的。
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4楼2008-02-16 19:37:56
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xiaohe160

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by davidann at 2008-2-16 17:51:
这样做理论上也是可以的，但是必须知道每个流出组分的响应因子，即单位浓度的组分在你所选定的波长处产生多少吸收，并且样品中所有组分都流出色谱柱，且在检测器上均可得到相应的色谱峰。然后根据Ci%=fiAi/(f1A1+ ...

流出组分的相应因子怎么确定？
我现在就是用制备色谱来制备标准品，想标定它的纯度。实验室还没有质谱。
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5楼2008-02-16 20:22:20
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