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rose.no.9

木虫 (著名写手)

[求助] 购买的厌氧菌活化失败,为什么,还有希望吗 已有1人参与

在CGMCC和CICC购买的厌氧菌种,按照购买时候的说明操作,可是都已经三四天了,还是没有长出菌落来。有没有做过的同学,提示一下我该怎么办?卖家说可能需要重新购买,好几千块钱呢。。。。谢谢!!
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
rose.no.9: 金币+2, 有帮助, 感谢回帖,算是个安慰吧,是在是急的没有办法,唉。。。难不成只能重新购买一次? 2014-03-12 20:07:28
你要看你的菌时哪年保藏的?如果时间很久了,也许是失活了。
还有厌氧菌我记得长得都很慢吧,楼主再等几天观察?
2楼2014-03-12 00:50:27
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

把具体方法列出来帮你看看,连帮你分析的机会都不给,光在那淌眼泪了
好好做事,踏实做人!
3楼2014-03-12 08:13:34
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rose.no.9

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ctt1984 at 2014-03-12 08:13:34
把具体方法列出来帮你看看,连帮你分析的机会都不给,光在那淌眼泪了

购买的封在安瓿瓶中的冻干粉。操作如下:1.开封。在超净台中,酒精消毒,灼烧,滴无菌水,镊子敲碎。2.悬浮。用移液枪吸取400微升液体培养基(配方是购买菌种时附的)加入安瓿中,混匀。3.用一次无菌性注射器吸取200微升菌悬液,加入厌氧管中(内有斜面培养基,厌氧管是抽真空后充入氮气)。4.放入厌氧培养箱中培养,37℃。7号下午接种的,现在观察来看,有点絮状的东西在斜面边缘,加入的液体培养基也还是呈液体状。但是在斜面上没有看到菌落长出来,是不是我加入的菌悬液过多了?还是我原本应该用液体摇床进行活化?反正现在感觉是死灰一片。。。。。失望,不知道该怎么办。
4楼2014-03-12 20:16:30
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ctt1984

木虫 (正式写手)

初学者

★ ★ ★ ★ ★
rose.no.9(dllchina代发): 金币+5, 谢谢热心应助 2014-03-13 10:42:44
dllchina: 回帖置顶 2014-03-13 10:42:52
引用回帖:
4楼: Originally posted by rose.no.9 at 2014-03-12 20:16:30
购买的封在安瓿瓶中的冻干粉。操作如下:1.开封。在超净台中,酒精消毒,灼烧,滴无菌水,镊子敲碎。2.悬浮。用移液枪吸取400微升液体培养基(配方是购买菌种时附的)加入安瓿中,混匀。3.用一次无菌性注射器吸取2 ...

一般来讲,商家卖给你的都是活化后分装给你的,理论上不会出错。我估计是你菌液涂多了,都长在一起形成菌膜了。要知道一管里面几亿个细菌,你还希望在那么小的斜面上长出单菌落,不太现实。建议你这么去做:
1,安培瓶中还有的话,取10ul的样子做10倍倍比稀释,分别涂平板,之后置于厌氧,37度培养,快的话24小时,慢的话也就48小时能长成单菌落。
2,安培瓶中没有的话,从你的厌氧管中用接种环轻轻挑一点,划线后置于厌氧,37度培养,待单菌落长出来后再纯培养
好好做事,踏实做人!
5楼2014-03-13 08:28:55
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rose.no.9

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by ctt1984 at 2014-03-13 08:28:55
一般来讲,商家卖给你的都是活化后分装给你的,理论上不会出错。我估计是你菌液涂多了,都长在一起形成菌膜了。要知道一管里面几亿个细菌,你还希望在那么小的斜面上长出单菌落,不太现实。建议你这么去做:
1,安 ...

浓度太大?我真没想过这个因素。可能是以前没有做过冻干粉的活化吧。不过,6管中有一管存活了。你说的也是一个可能的原因,非常感谢,我会去试一试~
6楼2014-03-13 20:08:13
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