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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 请教【关于荧光分光光度法】
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novelty_ml

铁虫 (小有名气)

[交流] 请教【关于荧光分光光度法】

请教各位高手，我在用荧光分光光度计扫描某种物质看其有无荧光时，发现，固定激发光波长扫描，得到的最大荧光波长总与激发光波长一致；反之，固定发射光波长扫描时，得到的最大激发光波长总与发射光波长一致，请问这是怎么回事？ 如果说明该物质无荧光，为什么总是在激发光与发射光一致时出峰？

[ Last edited by yensh on 2008-2-4 at 16:45 ]
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1楼 2008-02-04 11:41:07
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xmuwxd

金虫 (正式写手)
这明显是瑞利散射峰啊，可以扩大扫面范围，或者调解激发波长，尽量避开瑞利散射和拉曼散射。
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2楼2008-02-10 12:43:23
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novelty_ml

铁虫 (小有名气)
谢谢！
可是一般发生瑞利散射的激发光波长在什么范围内呢？
我当时好像扫激发光范围为200-500nm，一直都是最大峰波长与固定的荧光波长相同。没有其它的峰，是不是可以说明这个物质就没有荧光呢？
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3楼2008-02-11 20:53:47
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prime2003

银虫 (小有名气)
你可以把荧光物质的浓度调整一下，调整到10e-9至10e-5，浓度过高或过低都会影响检测（过低仪器检测不出，过高会有浓度猝灭现象）。
你现在检测到的最大峰波长应该就是各种散射产生的信号包括瑞利、丁铎尔和样品池散射等，在靠近激发光波长还会有拉曼散射峰。如果荧光峰及靠近激发光波长，上面说的这些信号会覆盖荧光峰。所以建议对未知样品检测，仪器的带宽适当调小些。

最后建议您看看《荧光分析法》这本书
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4楼2008-02-14 09:07:13
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