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lonicolas银虫 (小有名气)
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[求助]
怎样确定荧光光谱的激发波长 已有2人参与
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| 固定一个波长，想得到发射谱。这个波长怎么定？？？ |
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4楼2014-04-03 11:28:16
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2楼2014-03-06 14:53:49
peterflyer 
木虫之王 (文学泰斗)
peterflyer
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【答案】应助回帖
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lonicolas: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-03-07 08:31:13
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lonicolas: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-03-07 08:31:13
| （1） 如果你的仪器有三维扫描功能，那就非常简单了，按照说明书要求去做就可以了。（2） 如果仪器没有上述功能，一般可将仪器的激发波长(EX)先设定为200nm，然后进行发射波长(EM)模式扫描，(EM)波长范围暂设定为 210－800nm，然后记录所有出现的峰值波长；改变激发波长(EX)后再扫描，如第二次发射图谱中的某个（或某些）峰的位置没有位移（或位移很少），一般来说这个（或这些）峰就是荧光峰；因为荧光峰的位置是不随激发波长的改变而改变的，仅是峰高（或峰面积）发生改变（3） 将确定的荧光峰的波长作为发射波长(EM)固定下来，再做激发波长(EX)的扫描，激发波长的范围要小于发射波长（根据斯拖克斯定律）；如果仅出一个峰则很简单确立下来，再将这个波长固定下来重新做真正的发射波长(EM)扫描，可以得到良好的信噪比的结果值；如果做激发波长(EX)扫描后出现几个峰，则需要有经验的选择了，一般选择峰形高度适合并又有一定带宽的峰为激发波长。 |
3楼2014-03-06 20:17:27
