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刘芳123

新虫 (初入文坛)

[求助] 设计引物

各位前辈，我是新手，请问我用primer5.0设计引物时，是不是先找到质粒和目的片段共有的酶切位点，再设计引物，如果目的片段上没有相应的酶切位点，是不是在设计引物时加上酶切位点，再设计引物，如何设计引物，如何寻找和加酶切位点啊，详细过程！求助
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1楼 2014-02-28 09:34:25
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-28 11:45:30
先找到质粒和目的片段共有的酶切位点，再设计引物，如果目的片段上没有相应的酶切位点，在设计引物时加上酶切位点，再设计引物，最后在5’端加上保护碱基，注意退火温度尽量一致，GC含量也达到一定要求，大概45%-55%
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植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
2楼2014-02-28 11:30:02
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刘芳123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-28 11:30:02
先找到质粒和目的片段共有的酶切位点，再设计引物，如果目的片段上没有相应的酶切位点，在设计引物时加上酶切位点，再设计引物，最后在5’端加上保护碱基，注意退火温度尽量一致，GC含量也达到一定要求，大概45%-55%

我就是不知道在primer5.0上怎么找他们共同的酶切位点
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3楼2014-03-01 23:31:41
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