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jolindamatch

铁虫 (初入文坛)

[求助] 大孔树脂动态试验中样品溶解问题,以及动态试验总体顺序,大神们教教我吧~~ 已有2人参与

最近一直在做大孔树脂动态试验,遇到很多问题,在论坛里看了更加不明白了:
1.我要纯化的物质是一种水不溶性的,但是溶于乙醇,因此静态试验时我做了不同浓度乙醇溶液对大孔树脂吸附量的考察,发现高浓度的乙醇溶液对我的物质的吸附并不好,但60%乙醇的吸附率最高,因此我的动态上样选用的是60%的乙醇,但是刚才在论坛里发现说上样液需要完全溶解才能上柱,否则可能导致柱子的堵塞等问题,我的问题是不能悬浮上样吗?如果要将我的物质溶解后上样,那吸附率不是就会很小了?我做静态试验确定最佳乙醇浓度还有必要吗?纠结啊...
2.现在动态试验不确定先进行哪步呢?是先确定上样流速吗,还是先确定上样液的浓度,然后是泄漏曲线(动态吸附量),然后再做洗脱部分呢?有没有具体流程呢?

真的好迷惑,看了好多文献,没有得到很好地解释,求大虫们帮帮我解答下吧,大孔树脂做了很久了......
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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辣笔v小新: 金币+2, 鼓励应助 2014-03-01 08:41:06
1.先找一个乙醇条件,能满足溶解你的物质,又能达到良好吸附率的条件。
2.找到的这个乙醇条件下的物质溶解度,就可以确定上样浓度,然后测定流速。注意流速和你的泄露曲线是一一对应的。一般来说流速慢的,载量高。选择一个适合的流速就好了。做好这些,再去做洗脱。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-02-27 12:57:57
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jolindamatch

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfman840 at 2014-02-27 12:57:57
1.先找一个乙醇条件,能满足溶解你的物质,又能达到良好吸附率的条件。
2.找到的这个乙醇条件下的物质溶解度,就可以确定上样浓度,然后测定流速。注意流速和你的泄露曲线是一一对应的。一般来说流速慢的,载量高。 ...

非常感谢您的回答 就是说我的物质还是要溶解了再进样,就是说做一下不同浓度乙醇溶液制成的样品液,我是进行静态吸附还是说进行上柱吸附测定同一时间流出液的浓度呢?大神可以告诉我吗?
还有就是我发现我的物质浓度不能太高,一般3mg/ml浓度的话就会出现沉淀了,那么我做上样液浓度的时候是不是就要小于3mg/ml呢?
3楼2014-02-27 13:43:37
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
辣笔v小新: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励应助 2014-03-01 08:40:42
首先,你可以测定静态下的吸附量,但是动态情况是个相互平衡的状态,吸附量可能会降低。所以有了静态数据后,你可以用静态环境下的乙醇溶液来走动态,测定动态结合载量。
如果你的浓度低的话,就别放那么高来做,在柱子上富集了,就沉淀了。你稀释后再上柱。洗脱条件也要摸索,找个kd值低的洗脱,防止洗脱液过浓导致沉淀堵柱子。
简单来说就是稀释上样,缓慢洗脱。
4楼2014-02-28 20:59:44
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10710010234

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

首先要使用不同溶剂不同浓度来浸提产品,确定产品在那种溶剂那种浓度下溶解度最大。
然后静态吸附试验。在这个试验中将这种溶剂溶解后的产品加入到不同的树脂中,研究那种树脂对产品的吸附性最好,然后再用不同浓度溶剂去解吸附,研究何种浓度的溶剂对产品的解析最好。
最后就是上柱了。
上样的浓度不用很高,你可以提高上柱液的体积。这又不是硅胶和葡聚糖。
烈日炎炎,我依旧呆在实验室
5楼2014-04-29 23:12:43
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