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抗肿瘤实验 已有2人参与
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| 请问各位虫友，为什么很多抗肿瘤的英文文献中检测caspase酶的表达量时，都选择caspase-3，caspase-8和caspase-9，希望热心的虫友可以帮我解答 |
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jms_guan
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【答案】应助回帖
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Caspase3 Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase3也称CPP32，是细胞凋亡过程中的一个关键酶，可以剪切procaspase 2、6、7和9，并可以直接特异性剪切许多caspase底物，包括PARP (poly(ADP-ribose) polymerase)，ICAD (Inhibitor of caspase-activated Deoxyri- bonuclease)，gelsolin和fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用，包括染色质固缩，DNA片段化等。同时caspase 3对细胞起泡(Cell blebbing)也起到关键作用。 检测原理基于casepase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测caspase 3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。参照黄色产物pNA制作的标准曲线，可以作为定量caspase 3酶活性的标准品。 Caspase-8 Caspase 8通常以酶原的形式存在，在细胞凋亡的信号转导过程中被激活，Caspase 8被认为是细胞凋亡信号转导过程中上游的caspase，在Fas-receptor和TNFR-1介导的细胞凋亡过程中caspase 8被激活，形成一个由p18和p10组成的二聚体，进一步激活下游的caspase 4，caspase 6，caspase 9和caspase 10。 本方法基于Caspase 8可以催化底物Ac-IETD-pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 8的活性。pNA在405nm附近有强吸收。 检测样本的405nm OD值参照pNA制作的标准曲线，可以计算样品的Caspase 8酶活性。 Caspase-9 Caspase 9也称ICE-LAP6或Mch6，是细胞凋亡信号转导过程中上游的caspase。线粒体释放细胞色素c以后，caspase 9可以和细胞色素c以及Apaf1形成复合物，同时被激活。激活的caspase 9可以激活细胞凋亡的最关键酶caspase 3，从而促进后续的细胞凋亡信号。Caspase 9的激活可以通过磷酸化进行调控。 本方法基于Caspase 9可以催化底物Ac- LEHD -pNA产生黄色的pNA (p-nitroaniline)，从而可以通过测定吸光度来检测Caspase 9的活性。pNA在405nm附近有强吸收。 检测样本的405nm OD值参照pNA制作的标准曲线，可以计算样品的Caspase 9酶活性。 |
2楼2014-02-26 08:58:34
3楼2014-02-26 18:34:15
jms_guan
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【答案】应助回帖
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xinghui1125: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-03-03 20:15:59
silicare: 金币+5, MedEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-03-05 17:07:53
xinghui1125: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-03-03 20:15:59
silicare: 金币+5, MedEPI+1, 应助指数+1, 谢谢参与 2014-03-05 17:07:53
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我也仔细查阅了一下，相对来说在Caspase家族中Caspase3、Caspase8和Caspase9的研究较多，也主要是由于Caspase8几乎能够激活所有的Caspase，表明其位于凋亡级联反应的定点，是非常有代表性的基因；另外Caspase9可以激活Caspase3和Caspase7，从而启动Caspase级联反应；Caspase3是细胞凋亡的主要执行者。我个人能够查询到的一点，希望对你有用！ |
4楼2014-02-26 19:59:10
treetreew
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5楼2014-02-28 16:13:49