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流式细胞仪测估测四膜虫基因组大小基因组大小 已有1人参与
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嗜热四膜虫有一大核和一小核，大核的体积大约是小核的52倍，基因组大小104M,45个拷贝，小核2个拷贝，基因组不确定。 我最近guava做的时候多半出现2个峰，做的好一点可以出现3个峰。第一个最大的丰基本上确定是细胞碎片，第二个峰是小核，第三个峰是大核。染料是Guava cell cycle reagent,成分含有PI。用大核估测到小核的基因组比预料中的差距很大 。 原因是杂质所占比例太大 ，很难和小核分离开。我想问的问题是：1在破碎细胞的时候，我磨得次数过多是否会对核有损伤；2有没有其他的处理方法可以分离小核和杂质；3 PI应该只对细胞核有作用（我做过染料浓度梯度试验，结果不理想），为什么特异性这么差；4加RNA酶是否必须，室温放置对核的降解是不是很严重（2小时左右）。 如果哪位有guava的使用心得请分享，谢谢！ |
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