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sundasoccer铁虫 (小有名气)
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[求助]
高分求助，关于骨转移瘤的细胞培养，不胜感激
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各位师长，一事相求，我做肺癌与前列腺癌的骨转移瘤细胞培养。肺癌的骨转移瘤查到了文献，前列腺癌的骨转移瘤没查到，该怎么操作？ 这是肺癌的骨转移瘤操作：选取手术前未经任何治疗的肺癌溶骨性骨转移的患者10例，切取转移灶进行细胞培养，于术中无菌条件下切取转移灶实体肿瘤组织块，立即浸入无血清培养液保鲜，将获得的组织材料在无菌条件下剪切成约1-2mm3小组织快，用0.25 %胰蛋白酶消化液在4度环境下进行冷消化12小时，离心后去除上清液，再次加入0.25 %胰蛋白酶消化液，置37度温箱中温热消化20-30分钟，离心去除胰蛋白酶并用细胞培养液漂洗2次，离心去除上清制备成细胞悬液。将该细胞悬液按5×105-1×106个/ml细胞计数接种于25毫升细胞培养液中，加入pH值为7.0-7.2的RPMI1640培养液4毫升(内含终浓度为100U/ml青霉素和100 μg/ml链霉素)置于37度、5%CO2、饱和湿度的恒温培养箱进行培养，约2-4天细胞开始贴壁生长后，依据不同细胞对胰蛋白酶消化液的不同耐受时间以及差异离心的方法将原代培养的混杂生长细胞进行分离、纯化，去除成纤维细胞等杂质细胞，获得所需的肿瘤细胞。 我的问题是：前列腺癌骨转移瘤是不是也可以这么操作？ 十分感激！ |
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