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xjyu

新虫 (小有名气)

[求助] 求助:关于气质联用分析代谢组学研究的问题,help!! 已有5人参与

各位大侠:小弟目前在做气质联用分析真菌代谢组差异的实验。大体步骤如下:
培养真菌细胞,菌体离心,液氮研磨破碎细胞得到菌粉,用纯甲醇萃取细胞代谢物3次合并萃取物,空离心浓缩仪中烘干,甲氧胺盐酸盐和N-甲基-N-(三甲基硅烷)三氟乙酰胺(MSTFA)衍生化,然后进行气质联用分析
目前问题:气质图谱峰较少(大概25个峰左右),适当修改分液比提高浓度还是不行,有的峰面积很大,衍生化产物(硅化物)出现,说明衍生化彻底,但就是不知道为啥代谢物种类这么少。我看别人文献气质联用分析代谢组能出峰200多个,最后最少可以挑选差异大的70-80个峰没问题,请各位做过相关研究的帮小弟分析下啦出出主意,这个问题困扰小弟很久了呀,小弟在此先谢谢啦!!!!
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wyy080214

实习版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
费姚永芬: 金币+2, 新年快乐 2014-02-04 19:17:28
想想提取液的改变,另外可以进行浓缩或者增加进样口温度
2楼2014-02-03 10:58:54
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phoenix_leo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

仪器条件,还有参考的文献。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
QQ:7134423 Pyrolysis-GCMS讨论群:338094255
4楼2014-02-10 18:11:05
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metabolomics

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我感觉还是你的仪器有问题,查查色谱柱、离子源是否太脏或者损伤严重、电子倍增角管寿命。建议用八氟萘测测仪器灵敏度。
5楼2014-02-11 10:21:23
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metabolomics

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xjyu at 2014-02-21 15:00:45
仪器是安捷伦的5975C,其余样品都没问题的,不知道换种溶剂提取行不行...

多少毫克湿菌体?加了多少溶剂提取?最后多少提取液去干燥?
甲氧胺盐酸盐用的浓度和体积?MSTFA体积?
8楼2014-03-02 13:42:51
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fe123333

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

也许是研磨不彻底   可以反复冻融+研磨试一下  你旋干之后,在小管底部能看到白色固体吗
10楼2014-03-19 20:21:30
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普通回帖

xjyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wyy080214 at 2014-02-03 10:58:54
想想提取液的改变,另外可以进行浓缩或者增加进样口温度

谢谢这位大侠,小弟试试看呀
3楼2014-02-10 16:11:16
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xjyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by phoenix_leo at 2014-02-10 18:11:05
仪器条件,还有参考的文献。

非常感谢,我再摸摸条件吧
6楼2014-02-21 14:53:54
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xjyu

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by metabolomics at 2014-02-11 10:21:23
我感觉还是你的仪器有问题,查查色谱柱、离子源是否太脏或者损伤严重、电子倍增角管寿命。建议用八氟萘测测仪器灵敏度。

仪器是安捷伦的5975C,其余样品都没问题的,不知道换种溶剂提取行不行
7楼2014-02-21 15:00:45
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xjyu

新虫 (小有名气)

内容已删除
9楼2014-03-07 22:16:31
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