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liumingyi

新虫 (初入文坛)

[交流] 干法和湿法的优缺点????

请问各位专家学者:
       过硅胶柱柱长一般多少最好?
       干法装柱和湿法装柱各自的优点和缺点是什么?什么时候用干法,什么时候用湿法?上样呢?
[search]柱色谱[/search]
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chexy524

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
做实验也没有多久,称不上专家什么的。
我们实验室里用的好像是400目的硅胶粉,一般干法过柱空白硅胶是样品硅胶高度的3~5倍就可以了。太长了过得太慢,太短了分不开。但是这个高度的前提是你要分离的物质rf值在0.2~0.3,且能够与上下的杂质点分开。湿法的时候可能要适当加高一点空白的硅胶,感觉没有干法分离的好。
如果样品没有吸附问题,又不着急,还是干法效果好一些。如果所要的点与杂质点分得很开,湿法过比较快。如果吸附的比较厉害的话,还是调好极性用湿法吧,过得快,吸附少。
3楼2008-01-16 13:30:37
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月亮弯弯

金虫 (著名写手)


tianruibencao(金币+1,VIP+0):切合实际,谢谢!
干法适合于大颗粒填料,比如20um以上颗粒的填料,干法装填比较好,匀浆法,比较适合细小颗粒的填料,比如5~10um的填料.
2楼2008-01-15 08:48:58
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spyang

木虫 (著名写手)

干法和湿法使用的理论依据不同:
1、干法:硅胶内部的孔径是干的,不能利用内部的表面积,所以负载量较小,需要材料较多
2、湿法:硅胶内部的孔径是湿的,可以充分利用内部的表面积,所以负载量较大,节省材料

在实际应用中:
1、干法装柱快,但是细硅胶上柱时容易发热,最好前面使用低极性溶剂预冲洗,另外装柱水平要求较高
2、湿法装柱较慢,但是适合新手使用
另外,干法和湿法理论依据不同,在分离中有事有不同的表现,如果湿法不能分开,干法是一个很好的选择。
使用中还需注意吸附量,湿法一定要材料使用偏小一些,希望个人在分离中仔细体会。

硅胶柱长为20-30cm长较为合适,不要超过40cm,否则一天很难过完,带来样品吸附等不良后果。上样最好用少量溶剂溶解后加入粗硅胶蒸干(这样上样比较快),以硅胶不冒泡为宜(必须接上防溅球,并用棉花堵住进气口,否则硅胶会被吸入旋转蒸发仪)。干法装柱不宜过紧,否则流速过慢!

[ Last edited by spyang on 2008-3-3 at 15:48 ]
从研悔书:一丝白发催人老,半世虚名误人深,万般豪情成旧事,点点孤意在兰馨。
5楼2008-03-03 15:39:20
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