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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 单抗腹水效价的测定
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蓝默儿

金虫 (小有名气)

[求助] 单抗腹水效价的测定 已有1人参与

在获得单克隆杂交瘤细胞株后，细胞上清效价的测定用间接ELISA方法测定，sp20上清作为阴性对照。
那么获得单抗腹水后，效价也用间接ELISA方法测定，阴性对照用sp20上清，还是sp20细胞制备的腹水，还是与自己实验无关的腹水作为阴性对照？
第二个问题是不是只要大于阴性值的2.1倍就可以判断为阳性。因为我在测效价时10倍稀释它有个突然下降值。
腹水        对照        腹水比列
3.052        3.125        102
3.066        0.122        103
2.889        0.14        104
2.341                105
0.741                106
0.451                107
0.393                108
0.283                109
在105有个突然下降，大于阴性值的2.1倍就可以判断为阳性的话，效价可达到108.
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微笑，自信，加油
1楼 2014-01-21 09:37:04
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lghmouse

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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蓝默儿: 金币+2, ★有帮助 2014-01-23 08:27:12
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-23 12:28:47
我记得当时我做的时候，腹水效价是做单倍稀释的，在单倍稀释到某一值是的荧光值同阴性对照做一个比值，通过这个比值来确定单抗的效价。
好久不做了，不知道能不能帮到你
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爱科研
2楼2014-01-22 15:53:44
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lghmouse at 2014-01-22 15:53:44
我记得当时我做的时候，腹水效价是做单倍稀释的，在单倍稀释到某一值是的荧光值同阴性对照做一个比值，通过这个比值来确定单抗的效价。
好久不做了，不知道能不能帮到你

谢谢，我用的是间接Elisa方法测定效价。听说别的实验室有用免疫荧光的。
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微笑，自信，加油
3楼2014-01-23 08:30:50
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