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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 哪款蛋白凝胶成像仪拍出来的照片背景低？
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天涯2012
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
11楼2014-01-16 07:56:19
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laom2013
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
12楼2014-01-16 08:03:54
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zhoupeng87
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
·
13楼2014-01-16 08:27:39
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
你拍的是考马斯亮蓝染色还是ecl化学发光？
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一直向前！
14楼2014-02-13 09:56:53
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winner00lk
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
15楼2014-02-13 10:16:58
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2014-02-13 09:56:53
你拍的是考马斯亮蓝染色还是ecl化学发光？

ecl发光
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16楼2014-02-13 10:19:43
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
引用回帖:
16楼: Originally posted by 酷哥哥1990 at 2014-02-13 10:19:43
ecl发光...

现在是用的四百万像素的吗，天能的？然后出现背景深的现象？
背景深我觉得有这样几个原因：
1 曝光时间不充分，造成背景噪声与样品条带不能分开；
2 WB实验中抗体孵育和后期洗膜的问题；
3 抗体质量问题。
天能的这款仪器使用可以联系我。
祝实验顺利！
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一直向前！
17楼2014-02-13 12:38:51
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hjyxm

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

背景高跟一二抗的浓度也有一定关系吧！
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好好工作！
18楼2014-02-13 16:04:28
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2014-02-13 12:38:51
现在是用的四百万像素的吗，天能的？然后出现背景深的现象？
背景深我觉得有这样几个原因：
1 曝光时间不充分，造成背景噪声与样品条带不能分开；
2 WB实验中抗体孵育和后期洗膜的问题；
3 抗体质量问题。
天 ...

1、曝光时间是5秒-60秒，其他人实验拍出来的效果蛮好的，背景几乎没有啊。
2、抗体孵育有没有什么需要注意的地方呢？比如说，膜是正面朝上还是反面朝上？
3、抗体应该有问题，因为有一次实验先做目的蛋白时，爆出来的条带乱七八糟，后索性也没用stripping buffer，重新封闭之后再看内参的条带，结果内参条带很正常。这只能说明是目的蛋白的抗体有问题吧？？？
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19楼2014-02-14 10:56:50
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by hjyxm at 2014-02-13 16:04:28
背景高跟一二抗的浓度也有一定关系吧！

你是如何设置一二抗浓度的呢？我用的是abcam的一抗，浓度是根据说明书上的推荐浓度来设定的。。。。
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20楼2014-02-14 11:00:10
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