【答案】应助回帖

laom2013

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12楼2014-01-16 08:03:54

zhoupeng87

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13楼2014-01-16 08:27:39

zhangxn2010

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你拍的是考马斯亮蓝染色还是ecl化学发光？

一直向前！

14楼2014-02-13 09:56:53

winner00lk

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15楼2014-02-13 10:16:58

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引用回帖:

14楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2014-02-13 09:56:53
你拍的是考马斯亮蓝染色还是ecl化学发光？

ecl发光

16楼2014-02-13 10:19:43

zhangxn2010

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16楼: Originally posted by 酷哥哥1990 at 2014-02-13 10:19:43
ecl发光...

现在是用的四百万像素的吗，天能的？然后出现背景深的现象？
背景深我觉得有这样几个原因：
1 曝光时间不充分，造成背景噪声与样品条带不能分开；
2 WB实验中抗体孵育和后期洗膜的问题；
3 抗体质量问题。
天能的这款仪器使用可以联系我。
祝实验顺利！

一直向前！

17楼2014-02-13 12:38:51

hjyxm

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【答案】应助回帖

背景高跟一二抗的浓度也有一定关系吧！

好好工作！

18楼2014-02-13 16:04:28

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引用回帖:

17楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2014-02-13 12:38:51
现在是用的四百万像素的吗，天能的？然后出现背景深的现象？
背景深我觉得有这样几个原因：
1 曝光时间不充分，造成背景噪声与样品条带不能分开；
2 WB实验中抗体孵育和后期洗膜的问题；
3 抗体质量问题。
天 ...

1、曝光时间是5秒-60秒，其他人实验拍出来的效果蛮好的，背景几乎没有啊。
2、抗体孵育有没有什么需要注意的地方呢？比如说，膜是正面朝上还是反面朝上？
3、抗体应该有问题，因为有一次实验先做目的蛋白时，爆出来的条带乱七八糟，后索性也没用stripping buffer，重新封闭之后再看内参的条带，结果内参条带很正常。这只能说明是目的蛋白的抗体有问题吧？？？

19楼2014-02-14 10:56:50

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引用回帖:

18楼: Originally posted by hjyxm at 2014-02-13 16:04:28
背景高跟一二抗的浓度也有一定关系吧！

你是如何设置一二抗浓度的呢？我用的是abcam的一抗，浓度是根据说明书上的推荐浓度来设定的。。。。

20楼2014-02-14 11:00:10