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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 哪款蛋白凝胶成像仪拍出来的照片背景低？
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)

[求助] 哪款蛋白凝胶成像仪拍出来的照片背景低？ 已有2人参与

最近换了一个实验室做western blot之后，用的是不同的凝胶成像仪，虽然同是天能的，但是感觉图片大不相同啊，一个背景低，一个背景高。查看了一下两个成像仪的参数，一个是一百多万，一个是四百多万，是不是因为像素高了，背景就容易被曝出来呢？
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1楼 2014-01-15 22:55:59
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酷哥哥1990

金虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2014-02-13 12:38:51
现在是用的四百万像素的吗，天能的？然后出现背景深的现象？
背景深我觉得有这样几个原因：
1 曝光时间不充分，造成背景噪声与样品条带不能分开；
2 WB实验中抗体孵育和后期洗膜的问题；
3 抗体质量问题。
天 ...

1、曝光时间是5秒-60秒，其他人实验拍出来的效果蛮好的，背景几乎没有啊。
2、抗体孵育有没有什么需要注意的地方呢？比如说，膜是正面朝上还是反面朝上？
3、抗体应该有问题，因为有一次实验先做目的蛋白时，爆出来的条带乱七八糟，后索性也没用stripping buffer，重新封闭之后再看内参的条带，结果内参条带很正常。这只能说明是目的蛋白的抗体有问题吧？？？
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19楼2014-02-14 10:56:50
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zhchzhsh2076
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
2楼2014-01-15 23:21:10
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kiss20085537

木虫之王 (文学泰斗)

联合国小木虫水区资深代言人

文献杰出贡献
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
帮顶

[ 发自小木虫客户端 ]
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哦吧，江南style，元芳，你怎么看？
6楼2014-01-16 00:17:02
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
★
酷哥哥1990(金币+1): 谢谢参与
你拍的是考马斯亮蓝染色还是ecl化学发光？
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一直向前！
14楼2014-02-13 09:56:53
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