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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 用实验区分mRNA 和ncRNA
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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曾经走过

金虫 (初入文坛)

[求助] 用实验区分mRNA 和ncRNA

如题：：在研究中发现一个新的哺乳动物细胞中的长RNA分子，设计实验研究它是编码蛋白质的mRNA、还是非编码RNA。
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1楼 2014-01-12 18:50:27
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致彩虹之巅

新虫 (初入文坛)
你好，现在你找到方法证明了吗？我们实验室要研究的一个基因，数据库已经预测它是非编码RNA但是如何用实验验证呢？急求
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2楼2014-07-31 09:20:52
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曾经走过

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 致彩虹之巅 at 2014-07-31 09:20:52
你好，现在你找到方法证明了吗？我们实验室要研究的一个基因，数据库已经预测它是非编码RNA但是如何用实验验证呢？急求

验证是mRNA还是ncRNA：真核生物中的mRNA有明显的特征序列，即5’帽子（m7G）和3’Poly（A）尾巴。而哺乳动物mRNA的3’端有20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，可以作为鉴别mRNA的标志。
     具体方法：首先合成15-20的聚dT和聚dA——>先进行聚dT的单引物PCR，经过5-10个循环——>加入聚dA继续进行PCR，经过25个循环——>结束后，进行电泳。如果得到了相应的扩增条带，说明此核苷酸序列是mRNA；反之，则为非编码RNA。
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3楼2014-08-06 11:33:50
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