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maruochen

木虫 (正式写手)

[求助] 显微注射 已有1人参与

一般往小鼠受精卵中注射RNA,注射针进入到细胞质什么位置?还有如何定量所注射的RNA或DNA?
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低着头走路,夹着尾巴做人
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专领金币

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

一般注入到原核中,雌雄原核都无所谓了
注入多少量RNA要根据你的实验要求。
需要显微注射专门的设备,可以调整你要注入RNA的量。如果没有这个设备,那就只能根据原核膨胀的大小来估计了。
2楼2014-01-04 21:57:31
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果绿色的小喵

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 专领金币 at 2014-01-04 21:57:31
一般注入到原核中,雌雄原核都无所谓了
注入多少量RNA要根据你的实验要求。
需要显微注射专门的设备,可以调整你要注入RNA的量。如果没有这个设备,那就只能根据原核膨胀的大小来估计了。

那我是用的eppendorf的显微注射仪,那个应该怎么去调整呢?
3楼2014-07-10 22:50:02
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专领金币

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 果绿色的小喵 at 2014-07-10 22:50:02
那我是用的eppendorf的显微注射仪,那个应该怎么去调整呢?...

如果你们有类似于 这个 “FemtoJet®显微注射仪” 的仪器的话,注射起来很方便,根据你实验要求,计算好dna浓度和注射量,这个仪器可以自动调节注入的量。具体调整,你要参考仪器说明书和你实验的具体用量进行计算。
如果你们没有这个仪器,或是类似的仪器,只有纤维操作器的话,注入的量没法精确,只能自己估计了。通过注入原核,看原核膨胀的大小来估计注入的量。如果你做包浆内注射的话,就无法通过原核膨胀来估计注入的量了。只能想其他办法了。
4楼2014-07-11 15:30:42
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果绿色的小喵

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 专领金币 at 2014-07-11 15:30:42
如果你们有类似于 这个 “FemtoJet®显微注射仪” 的仪器的话,注射起来很方便,根据你实验要求,计算好dna浓度和注射量,这个仪器可以自动调节注入的量。具体调整,你要参考仪器说明书和你实验的具体用量进 ...

那个仪器是不是可以用脚踏板来控制?那它是怎么调节注射量的呢?能举个例子不?比如压力多少,频率多少等注射量就为多少?
5楼2014-07-17 14:01:47
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