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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)

[求助] 样品极性大,适合用液液萃取处理血样吗?求指点 已有1人参与

样品极性较大,易溶于水和甲醇,适合用液液萃取处理吗?能萃取出来吗?
如果能,打算用正丁醇,乙酸乙酯,和环己烷试试实验效果,请问是要少量多次萃取吗?每次用几倍于血浆的试剂合适呢?
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rosegarden

金虫 (正式写手)

★ ★
辣笔v小新: 金币+2, 鼓励应助 2014-01-04 19:51:39
引用回帖:
5楼: Originally posted by 踮起脚尖2012 at 2014-01-03 08:39:12
用的液相
因为是新做药代,好多不太懂请问灵敏度是什么要求啊?出峰就行吗?
沉淀蛋白回收率100%,我的也就50%吧...

灵敏度主要看性噪比,LLOQ至少大于10。样品峰和杂质峰基线分离
回收率不是非常重要,只要你方法学其他部分都没有问题,50%也是可以接受的
坚持
6楼2014-01-04 19:45:17
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查看全部 9 个回答

rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
踮起脚尖2012: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-01-06 18:12:43
为什么不直接蛋白沉淀?灵敏度不够?
极性大的话,你应该选择极性大的提取溶剂。
一般1:5提取应该没什么问题了,萃取过程依靠涡旋完成
坚持
2楼2014-01-02 15:35:10
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by rosegarden at 2014-01-02 15:35:10
为什么不直接蛋白沉淀?灵敏度不够?
极性大的话,你应该选择极性大的提取溶剂。
一般1:5提取应该没什么问题了,萃取过程依靠涡旋完成

现在是想考察一下哪种方法提取回收率高。直接沉淀蛋白也做了,杂质好多,杂质峰比样品峰高很多,峰面积倒是还可以,这样直接沉淀蛋白法可以吗?
药代提取回收率多少合格呢?对杂质有要求吗?
3楼2014-01-02 18:51:56
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rosegarden

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 踮起脚尖2012 at 2014-01-02 18:51:56
现在是想考察一下哪种方法提取回收率高。直接沉淀蛋白也做了,杂质好多,杂质峰比样品峰高很多,峰面积倒是还可以,这样直接沉淀蛋白法可以吗?
药代提取回收率多少合格呢?对杂质有要求吗?...

你用液相还是液质做的?只要血浆样品中的杂志不干扰你的样品峰就行了。
如果蛋白沉淀的灵敏度够,肯定优先选择前处理过程简单的处理方法。
对提取回收率没有严格的要求,蛋白沉淀提取回收率一般在100%左右。
坚持
4楼2014-01-02 21:17:23
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