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多糖分离 已有1人参与
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想分离酸性糖和中性糖，该选用什么交换树脂呢？DEAE-52还是DEAE-Sepharose CL-6B？ 有什么较大差别？ |
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【答案】应助回帖
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至今应用的阴离子交换剂有二乙基氨基乙基纤维素(DEAE2cellulose ) ,DEAE2葡聚糖( DEAE2Sephadex ) DEAE2琼脂糖(DEAE2Sephadex) 3种, 其中以DEAE2cellulose应用得最为广泛。DEAE2cellulose具有开放性的骨架, 多糖能自由进入载体中并进行迅速扩散。它有较大的表面积,虽然其离子交换容量仅为0170 ～0175mmol /g, 但其对 多糖的吸附量较离子交换树脂大许多。另外由于纤维素上的离子交换基团较少, 排列疏散且呈弱碱性, 所以对大分子的吸附较弱, 用一定离子浓度的盐就可将其洗脱下来。阴离子交换柱层析适合于分离各种酸性、中性多糖以及粘多糖。其分离机理不是单一的离子交换, 而是吸附与解吸附, 所以其不仅可应用于中性多糖与酸性多糖的分离, 也可应用于不同中性多糖的分离。一般在pH值为6时, 酸性多糖能吸附于A IER上, 中性多糖不吸附, 然后用pH值相同、离子强度不同的缓冲液将酸性多糖分别洗脱下来, 但如果柱为碱性(即OH- 型) ,则中性多糖也能吸附。另外,些多糖还能与硼酸形成络合物, 采用硼酸型A IER或硼酸溶液作流动相, 从而使糖类物质能在A IER上进行分离纯化。如黄芪用水提取, 经Pb (OAC) 2 沉淀除去蛋白质, 加乙醇可使多种糖沉淀出来。粗多糖再溶于水, 通过硼酸型DEAE2纤维素柱, 以0101mol /L硼砂溶液洗脱, 再用乙醇、丙酮处理, 可得黄芪多糖成分AG21。其他黄芪多糖成分如AH21和AH22等, 也用同样的工艺进行分离纯化。吴亚林等通过DEAE2Sepharose fast flow阴离子交换层析得到 纯化的无花果多糖( FCPS) 。 |
2楼2013-12-19 08:35:27
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3楼2013-12-19 08:36:43
