应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNAse A 配制煮沸问题
81/1返回列表
查看: 3476  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

变心的翅膀

木虫 (小有名气)

[求助] RNAse A 配制煮沸问题 已有4人参与

请教各位虫友在配RNA酶的时候母液煮沸是否会变浑浊？
我们配的时候每次一煮就会变混，不知道各位是不是也这样？
不煮又怕DNase把DNA给切了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
男儿当自强
1楼 2013-12-18 13:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-18 17:30:38
根据不同的商品，有些是要煮的，有些是不煮的。没有发生过浑浊现象。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-18 17:02:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天猫天猫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-18 17:30:44
如果买的是DNase free的RNase就不用煮，否则就要煮。煮也是用沸水浴煮，不是直接用电加热器煮，呵呵
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-18 17:09:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

变心的翅膀

木虫 (小有名气)
又试了一下，之前用tris-hcl和N?aCl配的，沸水煮15分钟，变浑浊了。这次直接用水配的，100度水浴15分钟，没有发生浑浊，下次直接用水吧。看了一下说明说是中性条件下浓度高时，核糖核酸酶可能会发生沉淀，所以导致浑浊，不知道是不是这个原因。总之这次还算顺利。谢谢各位的热心回复。
赞一下(1人) 回复此楼
男儿当自强
4楼2013-12-19 14:16:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqbzfun

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

这么久了，估计楼主都弃楼了。不过还是说下，以便后来人吧。
RNase母液浓度可配到100mg/mL，可用 50mM Tris （pH7.4）+50%甘油溶解，煮沸15min，缓慢冷却至室温后，放置于-20℃冷藏。
赞一下 回复此楼
5楼2015-06-23 16:02:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pqq226

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by lqbzfun at 2015-06-23 16:02:49
这么久了，估计楼主都弃楼了。不过还是说下，以便后来人吧。
RNase母液浓度可配到100mg/mL，可用 50mM Tris （pH7.4）+50%甘油溶解，煮沸15min，缓慢冷却至室温后，放置于-20℃冷藏。

你好，我的RNase A是溶液浓度为100mg/mL，要配成20mg/mL，直接用去离子水可以嘛？
赞一下 回复此楼
开心最重要
6楼2015-06-24 15:20:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

变心的翅膀

木虫 (小有名气)
你之前的100的是什么配制的？我觉得最好还是用同样的溶液
赞一下 回复此楼
男儿当自强
7楼2015-06-25 07:50:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖



还以为煮RNase灭活DNase已经成了传说。。。

现在DNase free RNase不是很便宜么？Qiagen质粒抽提试剂盒里面配的100mg/mL的很好。
赞一下 回复此楼
8楼2015-06-25 10:09:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 变心的翅膀 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭