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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 2000的Mark跑成这个样子，是怎么回事？我应该怎么改进？求助！求助！
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湖畔狂想

金虫 (小有名气)

[求助] 2000的Mark跑成这个样子，是怎么回事？我应该怎么改进？求助！求助！ 已有7人参与

我跑的是1%的琼脂糖
跑出来的Mark不直，有时还有空心的现象。
请问这是怎么回事？
我应该怎么做，才能跑出标准的Mark。
2000的Mark跑成这个样子，是怎么回事？我应该怎么改进？求助！求助！
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1楼 2013-12-17 18:42:09
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶不均匀或者电压太高
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学习使你立于不败之地
6楼2013-12-18 15:46:47
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普通回帖

Dr.G

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-18 08:55:48
你用的MARKER是DL2000 PLUS？
DL2000 PLUS有7条参考片段啊（100,250,500,750,1000,1500,2000）
你这怎么只有6条参考片段？
胶的浓度可能不均匀，先确定配胶过程没有问题
还有你跑电泳跑了多久，太久了话，效果自然很差，一般40mins就O了
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2楼2013-12-17 19:32:42
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湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Dr.G at 2013-12-17 19:32:42
你用的MARKER是DL2000 PLUS？
DL2000 PLUS有7条参考片段啊（100,250,500,750,1000,1500,2000）
你这怎么只有6条参考片段？
胶的浓度可能不均匀，先确定配胶过程没有问题
还有你跑电泳跑了多久，太久了话，效果自 ...

DL 2000,2000\1000\750\500\250\100
配胶时就是加热，沸腾后拿出来摇匀，直到没有颗粒，然后就倒在板上了。每次电泳也就30min。
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3楼2013-12-17 20:07:34
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danio112

银虫 (小有名气)
换换电流液
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4楼2013-12-17 20:44:04
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yanhuangzi

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-19 09:17:27
可适当提高染料如EB浓度带胶凝固完全在进行电泳，我们实验室一般20-30分钟。
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5楼2013-12-18 11:38:55
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湖畔狂想

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yuren2009 at 2013-12-18 15:46:47
胶不均匀或者电压太高

你们实验室用的电压是多少？
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7楼2013-12-18 20:23:04
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r-rainbow

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶不匀或者没完全干
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8楼2013-12-18 21:44:54
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yuren2009

木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 湖畔狂想 at 2013-12-18 20:23:04
你们实验室用的电压是多少？...

看你的电泳槽多大了？我一般用100左右。
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学习使你立于不败之地
9楼2013-12-18 22:36:30
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shengsong

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
湖畔狂想(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2013-12-19 09:17:35
这个marker整体的移动速率是一样的，但是不是直线，上面的朋友也都说了
1，换tae；
2，胶不均匀；
3，我个人觉得有可能是你胶上点样的孔没有平滑成直线，没有等胶完全凝固就拔梳子或者是胶的浓度过低，无法位置点样孔的平面，导致一开始就不是直的；
4，最后可能其他原因，如电泳槽有略微的变形之类的其他原因导致的电压分布不均匀导致的？这个不太确定
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10楼2013-12-18 22:55:15
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