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纤维素酶活
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我用16.9g纤维素酶配制5ml溶液,之后取0.5ml加1.5ml柠檬酸缓冲溶液,1*6cm滤纸,50℃下60min,之后加3mlDNS,煮沸5min,之后取200微升,加2.5ml去离子水,测吸光度0.212,将吸光度带入我测得葡萄糖公式得葡萄糖0.01255mg/ml,之后带入酶活公式X=A*l/0.5*n得3.388U/ml,总感觉测得酶活过低,我是这样算的0.01255*2*135 135是稀释倍数,我是这样算的,一开始0.5ml酶液加1.5缓冲液最后加3mlDNS相当稀释10倍,之后取200微升加2.5ml水相当稀释13.5倍,最后得总稀释135倍 按理说我买的纤维素酶酶活写的是大于等于15000U/g,那1mg应该大于等于15u呀,那我稀释的浓度1ml里面应该有3mg多酶计算的酶活应该是30-40呀 请各位帮忙解惑,谢谢大家! |
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