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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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耗子怕猫

金虫 (小有名气)

[交流] 怎样进行葡聚糖凝胶的预处理???

急切~

请大家帮帮忙,不想浪费老板的钱,葡聚糖凝胶实在太贵了
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liu200479

木虫 (正式写手)

louyiceng(金币+0,VIP+0):谢谢
不客气,药学是团结合作才的行业
4楼2008-01-08 16:09:55
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liu200479

木虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢应助!
louyiceng(金币+0,VIP+0):谢谢
凝胶预处理:
1sephadexG凝胶有个换算公式,根基公司计算出膨胀后的凝胶体积,必须向售货方要说明书,以确定装柱流速和分离最佳流速防止流速过高压坏凝胶。而且要注意软胶和硬胶装柱方法有别sephadexG,DEAE-sephadex-A系列为软胶sephacrylS,Superdex为硬胶,填充方法不同。
2 称取凝胶干粉12克,放入250毫升锥形瓶中,加入过量的水,室温浸泡24小时,或沸水浴(100)浸泡3小时。
3. 溶胀平衡后的凝胶用倾法除去细颗粒。如果没有细颗粒不用清。其方法是用搅棒将凝胶搅匀(注意不要过分搅拌,以防止颗粒破碎),放置数分钟机,将未沉淀的细颗粒随上层水倒掉。浮选3-5次,直至上层没有细颗粒为止。
4 将浸泡后凝胶抽干,用300毫升洗脱液平衡1小时,减压抽气10分钟以除去气泡。 5. 将层析柱垂直装好,在柱内先注入1/4-1/5的水,底板以下全部充满水,不留气泡,关闭柱出口,出口处接上一根直径2 mm细塑管越短越好防止分开的样品扩散导致分离失败。
6取柱直径大于1cm色谱柱(直径必须大于1cm),务必使柱垂直地面,接上装柱器,摇动装凝胶的瓶(切勿摇太快,以免空气再逸入),使形成均一的薄胶浆,将溶胀好的sephadexG用漏斗一次性倒入色谱柱中。
7 将色谱柱下端出口街上横流泵,打开下端出口,用横流泵调节流速为XXml/min,(此处必须根据说明书来调流速防止压坏凝胶,最佳流速分的样品多)并保持此流速xh,关闭下端出口,将色谱柱接上端加上柱头,用横流泵排除管路中的气泡,并与上端的柱头相接,打开下端出口。
8 柱装好后用蓝色葡聚糖2000检查层析,色带狭窄并且均一。
2楼2008-01-02 14:29:48
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耗子怕猫

金虫 (小有名气)



多谢楼上的大侠~
3楼2008-01-05 15:05:12
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