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loveerobin

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pcr体系的各组分都可能有问题
保证其他组分不改变的情况下,更改任一成分
11楼2013-12-11 13:49:45
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huahu3600

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
模板的问题,很明显。
你的模板是什么?
质粒?基因组?cDNA?
12楼2013-12-11 15:53:07
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finestar0706

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by huahu3600 at 2013-12-11 15:53:07
模板的问题,很明显。
你的模板是什么?
质粒?基因组?cDNA?

就是真菌的DNA……
13楼2013-12-11 16:10:41
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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pcr产物不好,可以考虑pcr的体系问题。
天道酬勤,厚德载物
14楼2013-12-11 16:44:14
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huahu3600

新虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by finestar0706 at 2013-12-11 16:10:41
就是真菌的DNA……...

(⊙o⊙)…,真菌的菌丝或者子实体直接抽提出来的DNA吗?那就是基因组DNA。
基因组DNA有可能不纯,讲解了等等。
先把你的基因组DNA走了电泳看一下呗
15楼2013-12-12 10:38:37
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20083630zhan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的模板明显不好,根本就没有明确的亮条带,我以前提取酵母基因组的时候也遇到过这种问题,放的时间长基因组就不是很好,建议你重新提试试
16楼2013-12-12 11:09:44
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123qsz321

木虫 (正式写手)

爬坡的土鳖

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的阴性对照 和空白对照在哪里  ?  阳性质控在哪里/?
17楼2013-12-12 11:23:31
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123qsz321

木虫 (正式写手)

爬坡的土鳖

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-13 15:08:00
首先  根据你的MARKER判断   染色和胶没有问题,其次  确定你的模板质量没有问题,再次  最主要更换你的酶, 最后 才是其他的一些细节问题。 这些问题都排除以后  在讨论。实验本身就是有时候 让你很无奈  ,有时候空白对照都出结果,慢慢 被折磨吧
18楼2013-12-12 11:26:45
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hermain

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-13 15:08:09
你的目的基因是多大啊?是用植物基因组P的吗?这个样子的话:1.可能是模板有降解,2.那些亮的条带可能是非特异性扩增,你换PCR仪了吗?可以提高退火温度再试一试,记得做对照。
19楼2013-12-12 21:46:56
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夜雾军刺

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是在做cdna文库吗
20楼2013-12-12 21:56:56
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