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loveerobin

木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

pcr体系的各组分都可能有问题
保证其他组分不改变的情况下，更改任一成分

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11楼2013-12-11 13:49:45

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huahu3600

新虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

模板的问题，很明显。
你的模板是什么？
质粒？基因组？cDNA？

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12楼2013-12-11 15:53:07

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finestar0706

铜虫 (正式写手)

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专业: 植物病理学

引用回帖:

12楼: Originally posted by huahu3600 at 2013-12-11 15:53:07
模板的问题，很明显。
你的模板是什么？
质粒？基因组？cDNA？

就是真菌的DNA……

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13楼2013-12-11 16:10:41

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deguohan

至尊木虫 (职业作家)

教授、博/硕导

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

pcr产物不好，可以考虑pcr的体系问题。

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天道酬勤，厚德载物

14楼2013-12-11 16:44:14

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huahu3600

新虫 (小有名气)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by finestar0706 at 2013-12-11 16:10:41
就是真菌的DNA……...

(⊙o⊙)…，真菌的菌丝或者子实体直接抽提出来的DNA吗？那就是基因组DNA。
基因组DNA有可能不纯，讲解了等等。
先把你的基因组DNA走了电泳看一下呗

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15楼2013-12-12 10:38:37

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20083630zhan

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你的模板明显不好，根本就没有明确的亮条带，我以前提取酵母基因组的时候也遇到过这种问题，放的时间长基因组就不是很好，建议你重新提试试

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16楼2013-12-12 11:09:44

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123qsz321

木虫 (正式写手)

爬坡的土鳖

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专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

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你的阴性对照和空白对照在哪里？阳性质控在哪里/?

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17楼2013-12-12 11:23:31

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123qsz321

木虫 (正式写手)

爬坡的土鳖

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专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-13 15:08:00

首先根据你的MARKER判断染色和胶没有问题，其次确定你的模板质量没有问题，再次最主要更换你的酶，最后才是其他的一些细节问题。这些问题都排除以后在讨论。实验本身就是有时候让你很无奈，有时候空白对照都出结果，慢慢被折磨吧

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18楼2013-12-12 11:26:45

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hermain

木虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
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gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2013-12-13 15:08:09

你的目的基因是多大啊？是用植物基因组P的吗？这个样子的话：1.可能是模板有降解，2.那些亮的条带可能是非特异性扩增，你换PCR仪了吗？可以提高退火温度再试一试，记得做对照。

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19楼2013-12-12 21:46:56

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夜雾军刺

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

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你是在做cdna文库吗

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20楼2013-12-12 21:56:56

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