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如何改善牛磺酸结合型胆汁酸的HPLC峰形?急!谢谢啦!
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我的混标里有7个胆汁酸标准品,游离型和甘氨酸结合型的胆汁酸峰形很好,但是牛磺酸结合型的如TUDCA,TCDCA,TCA的峰都是很严重的拖尾峰,趴着像钝角三角形,不仅峰形丑,因为其严重拖尾,也使得和其他胆汁酸的分离度不好。我用的是安捷伦1200的液相,紫外和ELSD串联作为检测器,所以不考虑用缓冲盐和其他难挥发的流动相,我水相用的酸水,0.1%、0.2%,0.3%,0.5%,1%,2%的甲酸和醋酸水溶液我都试过了,峰形和分离度改善不明显,甲醇,乙腈我也都有试过,都不理想!想知道是什么原因,有什么解决办法么?如果在标准品配置过程中加少量的氨水会不会改善牛磺酸结合型的峰形,但同时会不会影响其他胆汁酸?另外,我想知道这三个牛磺酸结合型胆汁酸的Pka值。比较着急,谢谢大家了!![]() ![]() |
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