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活性污泥中蛋白质的测定方法
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蛋白质的测定采用改进的Lowry法，测定步骤如下: 取待测液2ml，加入试剂甲2.8ml，混匀，室温下放置15 min。再加0.4ml试剂乙，立即混匀。30min后，在750nm下比色(以去离子水为参比)。再由标准曲线求出蛋白质的浓度。 ② 标准曲线的绘制 用牛血清白蛋白配制浓度为250μg/ml的溶液作为标准蛋白质溶液。 取试管6支，依次加入由标准溶液配制的浓度分别为0、50、100、150、200、250μg/ml的蛋白质溶液各2ml，再用①中所述方法测出各浓度溶液对应的吸光度， ③ 试剂甲(Na2CO3－NaOH－酒石酸钠－CuS04)的配制方法 称取2.95gNaOH、14.2g Na2CO和0.14g酒石酸钠，溶于去离子水中，定容至500ml，制得试剂A。将1.423g CuS04.5H20溶于去离子水中，定容至100ml，制得试剂B。再把试剂A和B按100:1的体积比混匀，即为试剂甲。混合后的溶液要尽快使用，最长不超过ld，以免增大误差。 ④ 试剂乙(Folin试剂)的配制方法 把100g钨酸钠(Na2WO4•2H20)、25g钼酸钠(Na2MoO4.2H2O)、700ml去离子水、50ml 85%的磷酸及l00ml 浓盐酸置于150ml 磨口圆底烧瓶中，充分混匀后，接上磨口冷凝管，回流10h。再加入硫酸锂150g，去离子水50ml及液溴数滴，开口煮沸15min，小火驱除过量的溴(在通风橱内进行)。冷却，稀释至l000ml，过滤，滤液呈黄色(若仍呈绿色，需再滴加液澳数滴，再沸腾15 min) ，贮于棕色瓶中。临用前，用标准Na0H溶液滴定，用酚酞作指示剂。根据滴定结果，将试剂稀释至相当于l mol/L的酸(稀释1倍左右)，贮于冰箱中可长期保存。 |
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