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jitao216

铜虫 (初入文坛)

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[交流] 反相离子对色谱法，流动相条件优化

大家好，请教一下

我正在摸反相离子对色谱法测定药物含量的流动相条件。因为文献上查到的流动相条件根本无法重现，所以现在必须自己来摸条件。首先说明一下，我的药物没有紫外吸收，我的检测波长是203nm。我的问题主要是一下几个方面：
1. 我按照文献上的流动相条件试了一下，我发现文献说药物是在8分钟左右出峰，而我的药物好像是在2分钟左右出峰，比溶剂峰还早，这可能么？
2.文献上是先调水相的ph值为3.1，再将水相和乙腈按比例混合。如果我调整水相和乙腈的比例，那么我是否应该先按文献上写的流动相条件配这流动相，再测一下流动相的PH值。摸条件时先调整水相和乙腈的比例，最后调流动相到与文献流动相相同的ph值。
3.反相离子对色谱法PH值特别重要，但是是水相的ph值重要，还是最终的流动相的PH值重要。ph值是根据什么确定的，是药物的PKa还是离子对试剂的PKa?
4.其实我最大的问题是想要找一本这方面的书，好好看一下，谁能推荐一本，谢了。