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木木夕星

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr污染

左右两边为marker，左边marker第一泳道为阴性对照，最亮的为阳性对照，不知道 为什么阴性对照总是有条带，p出条带都不是很亮请各位给点宝贵意见哈
pcr污染
20131117pcr2.jpg
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1楼 2013-12-04 22:04:44
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lm2570

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2014-01-27 00:01:58
我的实验室以前出现过这个问题，阴性对照只是没加模板DNA，其它引物，聚合酶、dNTP等都加了，很可能水有问题。
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2楼2013-12-04 22:09:52
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zhang宇微

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-27 00:02:17
模板或者引物的问题吧，换一个高保真的酶呢

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-12-04 23:44:43
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liyongliangx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-01-27 00:02:25
要么水，要么酶。我之前也遇到这样的问题，换了好点的酶就OK了。很多国内生产的酶 质量真心不过关啊
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4楼2013-12-05 08:50:17
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看海的snoopy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 00:02:45
有污染了呗，重新做，注意实验室污染控制，换水换buffer。平常的时候注意不要把ladder或者模板不要和PCR反应试剂放一起。
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5楼2013-12-05 09:41:58
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木木夕星

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lm2570 at 2013-12-04 22:09:52
我的实验室以前出现过这个问题，阴性对照只是没加模板DNA，其它引物，聚合酶、dNTP等都加了，很可能水有问题。

水都是新灭过的的超纯水啊，应该没问题的
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6楼2013-12-17 16:49:38
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