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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种保藏
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jiang198696

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 菌种保藏

产多粘菌素E的多粘杆菌用什么保护剂可以使其在零下20度条件下存活时间比较长，我用过甘油、甘油加乳糖，可是在3个月之后基本死光。恳请高手指点，万分感激。
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1楼 2013-11-25 19:48:05
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
多粘类芽孢杆菌用甘油保藏完全额可以，将菌液离心收集菌体，直接加入15%或是30%的甘油，我的保藏了2年存活率还是很高的。
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2楼2013-11-26 09:13:09
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mumuzhen

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
脱脂奶粉冻干也挺方便的
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3楼2013-11-26 10:21:39
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jiang198696

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wubingqi at 2013-11-26 09:13:09
多粘类芽孢杆菌用甘油保藏完全额可以，将菌液离心收集菌体，直接加入15%或是30%的甘油，我的保藏了2年存活率还是很高的。

我们的配方是不产芽孢的，平时的选育是大量的，为了方便一般都保存在零下20度的冰箱里，用种子液直接加到甘油管中，使甘油浓度为20%左右。
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4楼2013-11-26 15:31:37
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bioedit

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-11-30 11:22:15
1.零下20度温度太高，可在零下20度预冻，第二天转入零下80度保持。
2.在不影响实验的情况下，可采用DMSO保存。
以上2种方法，我都用过效果很好
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5楼2013-11-26 16:23:05
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jiang198696

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by bioedit at 2013-11-26 16:23:05
1.零下20度温度太高，可在零下20度预冻，第二天转入零下80度保持。
2.在不影响实验的情况下，可采用DMSO保存。
以上2种方法，我都用过效果很好

为了做实验的方便，我是想在零下20度的条件下，通过合适的保护剂来延长存活期
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6楼2013-11-26 22:09:17
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by jiang198696 at 2013-11-26 15:31:37
我们的配方是不产芽孢的，平时的选育是大量的，为了方便一般都保存在零下20度的冰箱里，用种子液直接加到甘油管中，使甘油浓度为20%左右。...

种子液离心之后收集具体，然后加入甘油试试，我们一般是这样保藏，极少发现不能接活的情况。
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7楼2013-11-27 09:47:59
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bioedit

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by jiang198696 at 2013-11-26 22:09:17
为了做实验的方便，我是想在零下20度的条件下，通过合适的保护剂来延长存活期...

那建议你试试DMSO，1mL菌液里加100uLDMSO
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8楼2013-11-29 09:33:17
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