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有谁做过PCR实验吗？
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请问有谁做过PCR实验吗？听说需要很多经费。整个研究生阶段我只有4000元RMB，不知是不是太少了。太贵我就只能换指标了。先谢谢了！ |
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jiangy0122
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2楼2007-12-19 23:41:34
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ququxiao(金币+3,VIP+0):谢谢分享经验：）
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主要看你做哪些项目，有些成熟的东西做起来可能会便宜，而有些东西就算有1万元也未必能做出来，还有一个很重要的问题就是你的实验室条件如何，如果PCR仪（最好是梯度的）、低温离心机（常温的很可能会把实验搞杂） 、超净台、压力锅、微量加样枪（最好是进口的，如吉尔森、eppendorf的；而国产的准确度很难保证）等 这些仪器都有的话很可能不需要花多少钱（就只需要买耗材、合成引物和试剂盒了），如果没有这些设备，那就很难了－－只能去蹭实验做了。 另外为了保证实验顺利和节省经费，建议在做实验前一定要注意以下几点： 1） 把实验相关的国外最新文献看透，这里面很有可能就有现成的引物和实验所需的循环数和退火温度（这3点往往就决定了你的实验顺利甚至成败与否！），而且文章的SCI分值越高往往可信度就越大－－国内的文章就别浪费太多的时间，大多数价值不大！ 另外还要经常跟那些做过PCR的人多交流－－如果这个人失败的次数越多可能对你就越有帮助！ 2） 在设计引物时千万别怕花小钱－－多合成几对引物（最多也就两三百块），到时一块儿做，这样往往能节省你大量的时间和金钱（我当年在最初只合成了一对，结果2个多月都做不出来，后来拿了4对一块儿做，不到一个月就搞定了） 3） 一些细节如tip头、EP管的DEPC浸泡时间和高压彻底与否、提取RNA的操作时是否于碎冰中进行、超净台灭菌彻底与否等等往往都会影响实验的结果 4） 做PCR实验有时要争分夺秒，所以最好在关键时刻找人给帮帮忙打个下手；另外实验一定要一气呵成，为了实验宁可不吃饭不睡觉！ PCR时有些试剂会致癌，所以如果要做就一定要注意 自我保护！ |
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