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| We tested the viability of hES and hiPS cells plated on Matrigel-coated plates in mTeSR at clonal density, which is an initial critical hurdle in the establishment of individual clonal lines. |
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3楼2013-11-21 09:18:38
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clavichord: 金币+5, 翻译EPI+1, ★有帮助 2013-12-19 12:21:56
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Description: Endothelial cell growth factor (ECGF) is an extract of bovine brain containing growth promoting factors for vascular endothelial cells of mammalian origin. ECGF has also been reported to be beneficial as a media supplement for the fusion and growth of hybridoma cells in monoclonal antibody production. Endothelial cell growth factor is prepared using a modification of the method of Maciag, et al. (1979) lyophilized from a sterile solution containing NaCl and streptomycin sulfate. Endothelial cells from human umbilical vein (HUVEC) can be established as primary cultures by traditional methods. The serial propagation of these cells has proved to be difficult. The long-term propagation of these cells in vitro can be achieved with an extract prepared from bovine brain. The introduction of a fibronectin or collagen matrix to the cell culture system allows to cultivate endothelial cells at clonal densities. With ECGF, the FCS requirement can be reduced. Heparin potentiates the mitogenic activity of crude preparations of ECGF. ECGF has also been reported to eliminate the need for feeder cells in the clonal growth of hybridomas and other cell types. 描述: 内皮细胞生长因子（ECGF）是一种从牛大脑中提取出来的，含有能够促进哺乳动物血管内皮细胞生长的因子。 也有报道称ECGF对用于单克隆抗体生产的杂交瘤细胞的融合和生长有一定的辅助作用。制备内皮细胞生长因子的方法是根据Maciag等的方法（1979）进行改进的，是从含有氯化钠和硫酸链霉素的灭菌溶液中冻干而来。 人脐静脉内皮细胞（HUVEC）可以用传统的方法进行原代培养。但这些细胞的持续增殖培养已被证明是非常困难的。牛脑中的提取物可以保证这些细胞的长期体外增殖。在细胞培养系统中加入纤维连接蛋白或胶原基质可以培养内皮细胞。当加入ECGF后，在细胞培养液中加入胎牛血清的量可以减少。肝素可以提高ECGF有丝分裂的活性。 也有报道称在杂交瘤和其他类型细胞的增殖时，加入ECGF后可以不用加入饲养层细胞。 以上是网上的平行文本，但未能指出具体的意思。 对分选的（肿瘤）干细胞分选后，进行稀释，稀释到每孔一个细胞。先计数，比如每毫升1000个，那你就用96孔板，每次每个孔板加1ul细胞悬液，进行倍比稀释，然后再在镜下观察每个孔，只有一个细胞的那个孔用笔圈起来就行了，然后进行培养。 我理解就这意思！ |
4楼2013-11-21 12:40:12
5楼2013-12-17 23:31:42
