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[求助]
【求助】小鼠肝细胞检测ROS（DCF探针）阳性对照无荧光 已有1人参与
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第一次实验小鼠肝细胞加染毒液后在完全培养基中37度孵育24h，用37度温育的HANKS洗两次后用DCF探针37度避光孵育30min，再用温育的HANKS洗掉探针后，荧光显微镜下蓝光激发检测，阳性对照和样品组细胞都无荧光，细胞碎片荧光很亮。 第二次实验取小鼠原代肝细胞后先用DCF37度避光孵育30min，洗完后用染毒液37度分别孵育30min,1h,2h,荧光显微镜下看阳性对照和样品组细胞还是没有荧光。 DCF是sigma买的，用DMSO配的母液，HANKS稀释的。 阳性对照双氧水500uM 基本实验步骤都是按照碧云天的ROS试剂盒的操作说明进行的，求助为什么细胞无荧光？ |
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