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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌种划线
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)

[求助] 菌种划线

求大神指导  我进行小量表达的菌种，表达的都很好，冻存了5天，现在拿出来划线  一个都没有长   是什么原因 呢
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1楼 2013-11-19 12:04:03
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玻璃杯three: 金币+2, ★有帮助 2013-11-19 22:34:23
以什么状态冻存的？一般干粉是冻存保藏，液体跟平板都是4度保藏。如果保藏没问题，就是复苏的问题
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2楼2013-11-19 14:04:33
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2013-11-19 14:04:33
以什么状态冻存的？一般干粉是冻存保藏，液体跟平板都是4度保藏。如果保藏没问题，就是复苏的问题

甘油冻存的  负40度呢 以前的都可以 就这次的不知道为什么都不长 一个都不长
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3楼2013-11-19 16:47:19
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抹香鲸

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玻璃杯three: 金币+5, ★有帮助 2013-11-19 22:33:34
你吸100μl，+合适培养基，放5ml tube，摇6h左右，看看浑浊不~
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everything will flow
4楼2013-11-19 19:10:15
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jingyu501

禁虫 (正式写手)
★ ★
感谢参与，应助指数 +1
玻璃杯three: 金币+2, ★有帮助 2013-11-19 22:33:45
本帖内容被屏蔽
5楼2013-11-19 20:08:40
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 抹香鲸 at 2013-11-19 19:10:15
你吸100μl，+合适培养基，放5ml tube，摇6h左右，看看浑浊不~

如果浑浊是不是说明菌种没问题  如果不浑浊就说明有问题是这样吗？  我想问下我再划线的同时有进行涂布，可是涂布的都有长  就划线的不长  这如何解释呢
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6楼2013-11-19 22:31:18
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玻璃杯three

金虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jingyu501 at 2013-11-19 20:08:40
复苏时间长点~

刚解冻的话，活性很低。时间长点，然后多转接几次就有活性了。

我的菌种只冻存了5天左右  也需要复苏时间长点吗 ？
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7楼2013-11-19 22:33:39
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lcg_1206

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
玻璃杯three: 金币+1, ★有帮助 2013-11-20 09:16:52
复苏时成活率低的原因如果你把线划得很密，可能就行！涂布前先做成菌液，这就多了一步活化啊

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2013-11-19 22:41:18
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物
引用回帖:
3楼: Originally posted by 玻璃杯three at 2013-11-19 16:47:19
甘油冻存的  负40度呢 以前的都可以 就这次的不知道为什么都不长 一个都不长...

先液体培养复苏一下试试，还是不行，就可能菌有问题！
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9楼2013-11-20 08:53:27
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陈_劼_翔

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 玻璃杯three at 2013-11-19 22:31:18
如果浑浊是不是说明菌种没问题  如果不浑浊就说明有问题是这样吗？  我想问下我再划线的同时有进行涂布，可是涂布的都有长  就划线的不长  这如何解释呢...

活菌量少了，划线时没沾到活菌。
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这是签名~
10楼2013-11-21 12:28:09
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