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doublehorse

银虫 (初入文坛)

[交流] SDS-PAGE问题求助

SDS-PAGE，考染，脱色，蛋白带清晰可见，但是，最前面的染料带（指示剂）却看不到，不知是何原因。请高手赐教。
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1楼 2007-12-18 22:30:36
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dog_608582

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
doublehorse(金币+5,VIP+0):谢谢您的帮助。
一般的是你的染料带已经跑出去了.只要你把电泳时间缩短就可以看到了.但是你为什么要看染料带呢?
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2楼2007-12-19 08:37:36
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随风而过

银虫 (小有名气)
你把染料带跑出去了，没有关系的，只要你的目的条带清楚就可以了，如果你非要有染料条带，那就在旁边看着点，别再跑出去就行了，你要想看着好看点就降低电压慢慢跑！带型能跑的很漂亮！
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3楼2007-12-19 08:54:07
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zhenyanweixiao

金虫 (正式写手)
你说的燃料带是不是指的是mark带？
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4楼2007-12-19 09:07:32
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doublehorse

银虫 (初入文坛)
我做SDS-PAGE的时候，等到电泳最前面的溴酚蓝指示带快到板子底部时，就停止电泳了，按说是没有跑出去吧。但是，染色和脱色后，只能看到蛋白带，看不到最前面的指示剂的带。我想看到染色和脱色后指示剂的带，主要是在标准蛋白的条件下计算目的蛋白的分子量。望高手继续赐教。
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5楼2007-12-19 23:18:04
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doublehorse

银虫 (初入文坛)
蛋白分子量的确定需要做log---Rf 图，其中R就是迁移率，它等于蛋白的迁移距离除以溴酚蓝的迁移距离。所以，染色和脱色后，一定要知道溴酚蓝的迁移距离。我现在的问题是电泳的时候，能够看到清晰的溴酚蓝的迁移带，等到染色和脱色后，就看不到了。请赐教啊。郁闷了好几天了。哈哈
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6楼2007-12-19 23:44:07
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doublehorse

银虫 (初入文坛)
对了，我是电泳---固定----染色----脱色的这样一个成寻走下来的。结果没有溴酚蓝的迁移带了。苦闷啊。
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7楼2007-12-19 23:45:37
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zemin_fang

木虫 (正式写手)
我在这里发过SDS-PAGE问题解析的帖子，你可以看看，下面是链接地址：
http://www.dxy.cn/bbs/post/view? ... amp;tpg=1&age=0
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8楼2007-12-20 19:38:06
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doublehorse

银虫 (初入文坛)
多谢zemin_fang. 您提供的资源太好了.再次致谢.
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9楼2007-12-21 10:07:19
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