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英鹤鸣

铜虫 (初入文坛)

[求助] 利用高锰酸钾滴定法做CAT酶活性测定的试验，请问煮死酶液怎么制取？

利用 高锰酸钾滴定法 做CAT酶活性 测定的试验，参考李合生的植物生理生化实验原理，有两个对照，加入的是煮死死酶液。有几个问题问大家：

1：请问煮死酶液怎么制取？采用100℃水浴处理吗？

2：我样品采集后，放在低温冰箱-20℃左右一星期左右，做出来的效果不好，即酶活性很低，据说采样后需要放置在-79℃的超低温冰箱里，但有人说样品研磨过滤上清液放在普通冰箱里冷藏一星期活性都不会有大变化。。。需要一直放在-79℃超低温冰箱里（样本或者上清液）吗？
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见到你，我就高兴了！
1楼 2013-11-11 22:25:46
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杨振aesop

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
英鹤鸣: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-11-13 14:03:52
1.煮死酶液的意思是对照组的酶粗提液吧，应该是煮沸过的，100℃水浴处理应该也差不多，但还是感觉煮沸死的更彻底。
2.-20℃效果肯定是没有-80℃好的，但是如果实验室有液氮的话，先把样品在液氮里浸上一下，再放-20℃里，效果要好一点。还有普通冰箱应该就是-20℃。
希望能够有所帮助！
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虽然我在搞科学，但其实我是一个作家
2楼2013-11-12 09:34:35
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英鹤鸣

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 杨振aesop at 2013-11-12 09:34:35
1.煮死酶液的意思是对照组的酶粗提液吧，应该是煮沸过的，100℃水浴处理应该也差不多，但还是感觉煮沸死的更彻底。
2.-20℃效果肯定是没有-80℃好的，但是如果实验室有液氮的话，先把样品在液氮里浸上一下，再放-2 ...

谢谢，直接吸取酶粗提取液，在试管中进行煮沸吗？
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3楼2013-11-12 11:07:24
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chuey

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 英鹤鸣 at 2013-11-12 11:07:24
谢谢，直接吸取酶粗提取液，在试管中进行煮沸吗？...

一般做对照都是直接吸取酶液在试管或离心管里面煮沸就可以了。现在我们实验室都不用滴定法测CAT酶活性了，现在的实验指导书上有用紫外分光光度计测定CAT的方法，操作很简单。曹建康的“果蔬采后生理生化实验指导”第120页
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4楼2013-11-12 15:34:10
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杨振aesop

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 英鹤鸣 at 2013-11-12 11:07:24
谢谢，直接吸取酶粗提取液，在试管中进行煮沸吗？...

你说的100℃水浴是对的，试管里装粗提液，然后放到100℃水浴煮沸
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虽然我在搞科学，但其实我是一个作家
5楼2013-11-12 21:06:39
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英鹤鸣

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chuey at 2013-11-12 15:34:10
一般做对照都是直接吸取酶液在试管或离心管里面煮沸就可以了。现在我们实验室都不用滴定法测CAT酶活性了，现在的实验指导书上有用紫外分光光度计测定CAT的方法，操作很简单。曹建康的“果蔬采后生理生化实验指导” ...

谢谢请问此种方法对温度有要求吗？如果材料放在-79℃，取出后怎么处理？
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见到你，我就高兴了！
6楼2013-11-15 11:56:26
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iFaner

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chuey at 2013-11-12 15:34:10
一般做对照都是直接吸取酶液在试管或离心管里面煮沸就可以了。现在我们实验室都不用滴定法测CAT酶活性了，现在的实验指导书上有用紫外分光光度计测定CAT的方法，操作很简单。曹建康的“果蔬采后生理生化实验指导” ...

紫外分光光度计为什么测得是弯弯曲曲的呢，不是笔直的线呢，样品也是放超低温冰箱，用pbs提取液做的，你用的那种方法

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7楼2015-09-18 00:21:27
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nino楊

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 英鹤鸣 at 2013-11-11 22:25:46
利用 高锰酸钾滴定法 做CAT酶活性 测定的试验，参考李合生的植物生理生化实验原理，有两个对照，加入的是煮死死酶液。有几个问题问大家：

1：请问煮死酶液怎么制取？采用100℃水浴处理吗？

2：我样品采集后， ...

你好，请问可以直接将采集的植物样本放到超低温冰箱中吗？

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8楼2019-05-31 11:58:26
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