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汕头大学海洋科学接受调剂
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hea123

新虫 (初入文坛)

[求助] 用双缩脲法测定蛋白质含量时,脂肪会对测量结果有影响嘛?为什么会有影响呢?

各种虫友,弱弱的问一下,用双缩脲法测定蛋白质含量时,脂肪会对测量结果有影响嘛?为什么会有影响呢?
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deng神之刺客

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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hea123: 金币+5, 有帮助 2013-11-02 11:40:05
感觉会有影响吧,双缩脲法测蛋白质含量的原理是:双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸、甘油、蔗糖等。
注:①蛋白质的种类不同,对发色程度的影响不大。
     ②含脂肪高的样品应预先用乙醚脱脂后再测定。
脂肪中的脂肪酸在加热条件下会与强碱发生反应的吧,对后面的OD值会有影响
2楼2013-11-01 19:09:46
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