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hea123

新虫 (初入文坛)

[求助] 用双缩脲法测定蛋白质含量时，脂肪会对测量结果有影响嘛？为什么会有影响呢？

各种虫友，弱弱的问一下，用双缩脲法测定蛋白质含量时，脂肪会对测量结果有影响嘛？为什么会有影响呢？
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1楼 2013-11-01 16:39:54
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deng神之刺客

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hea123: 金币+5, ★有帮助 2013-11-02 11:40:05
感觉会有影响吧，双缩脲法测蛋白质含量的原理是：双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。
紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸、甘油、蔗糖等。
注：①蛋白质的种类不同，对发色程度的影响不大。
     ②含脂肪高的样品应预先用乙醚脱脂后再测定。
脂肪中的脂肪酸在加热条件下会与强碱发生反应的吧，对后面的OD值会有影响
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2楼2013-11-01 19:09:46
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