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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答中转子版 » [已解决]请教液相色谱峰对称度不好的解决方案
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wenrong196

木虫 (正式写手)

[交流] [已解决]请教液相色谱峰对称度不好的解决方案

最近做液相测一中性物质(甾醇类)含量时，该物质对应峰的对称度一直不好．基本稳定在1.10-1.16之间.
柱子是新买的安捷仑TC  C-18柱.以前用同样的流动相做没有问题,最近才出的问题.
也试过加三乙氨,调PH,但对称度还是没有改善.

请教各位虫友有没有好的解决方案?!

具体图形及参数如下:
等度洗脱   Flow=1.0        Wavelength:   210

Ret.Time                  Height         Area         Asymmetry(EP)         Plates(EP)                  
min                  mAU          mAU*min                       
18.98                17.501        7.044              1.16                     14859



文件名: 1.JPG
描述: 1.JPG
下载链接: http://www.fs2you.com/files/dd420a9c-a6f0-11dc-aaf2-0014221f3995/
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[ Last edited by wenrong196 on 2007-12-19 at 09:13 ]
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1楼 2007-12-10 15:23:59
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signal023

荣誉版主 (知名作家)

No stupid question, no q .

优秀版主
★
wenrong196(金币+1,VIP+0):不需要做其他处理,但还是感谢你!
不知你新买的柱子有没有作过使用前的处理?
好象测不同的物质,柱子要做不同的处理吧,不知你做了没有?
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欢迎常来“出国留学区”！
2楼2007-12-10 15:49:07
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wenrong196

木虫 (正式写手)
不需要做其他处理啊！
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3楼2007-12-10 22:08:59
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yhyh96

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
wenrong196(金币+3,VIP+0):谢谢您的热心解答
一般是通过PH改善,实在不行就加少量四氢呋喃也可以改善峰型,
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4楼2007-12-11 09:31:37
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guoguo831101

金虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wenrong196(金币+8,VIP+0):谢谢您的热心解答
因为不是十分清楚你的具体情况，只能给你几个建议，你可以选择性的试试
1.降低进样量
2.增加柱温
3.降低流动相的粘度
因为每个柱子对样品量的承受力，流动向的选择不同，但安捷仑的柱子应该还是不错的，如果都试了还不可以，你可能要考虑是不是样品的问题
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5楼2007-12-11 10:27:47
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么辣子

银虫 (正式写手)
★ ★
wenrong196(金币+2,VIP+0):谢谢你的帮助,柱子在60度下加热是没有问题的!
楼上说减小进样量或进样浓度 不妨试一下
不过 提高柱温就不要用  HPLC的柱子不能加热 否则会损坏柱子
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6楼2007-12-12 09:02:37
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yuhao8899

金虫 (小有名气)
★ ★
wenrong196(金币+2,VIP+0):谢谢您的热心解答
从你提供的图上看，峰形是可以的，理论板数也够高。对称因子你从哪儿得来的数据。不会是resolusion（分离度）吧
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7楼2007-12-14 18:56:47
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wenrong196

木虫 (正式写手)
楼上的不好意思,开始打错了应该是Asymmetry(EP)  对称度
已经更正!
谢谢
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8楼2007-12-15 10:56:07
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h1u2a3n4g

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
wenrong196(金币+4,VIP+0):谢谢您的热心解答
引用：
      a.筛板阻塞；反冲色谱柱、更换进口筛板
　　b.色谱柱塌陷；填充色谱柱
　　c.有干扰物质的存在；使用更长的色谱柱、改变流动相或更换色谱柱
　　e.流动相PH值不合适；调整PH值，对于碱性化合物，低PH值更有利于得到对称峰
　　f.样品与填料表面的溶化点发生反应；加入离子对试剂或碱性挥发性修饰剂或更改色谱柱
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9楼2007-12-15 17:09:42
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么辣子

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wenrong196(金币+8,VIP+0):你说的 “对称因子大约在0。9~1。25 也可以 ”有根据吗？药检局认可吗?期待你的回复!
对称因子大约在0。9~1。25  算是峰性形很好拉  不影响定量就可以
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10楼2007-12-15 19:40:17
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