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zhouxiaofei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-10-31 13:08:41
如果片段测序没有问题,连接最主要是载体和片段的摩尔比,在1:1-3之间比较好,建议你胶回收后,再走个电泳根据亮度判断怎么加比例,我用fermentas的连接酶,一般30min中就ok了,3.1插入过4k片段也ok。

还有需要注意一点,你做酶切的时候有些酶是有星活性的,需要注意下酶切时间,保证酶切正确。

其实不用分析太多原因,严格每步都质控好,重复一次就ok了!希望有帮助。
11楼2013-10-31 10:29:08
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