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zhouxiaofei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-10-31 13:08:41
如果片段测序没有问题，连接最主要是载体和片段的摩尔比，在1:1-3之间比较好，建议你胶回收后，再走个电泳根据亮度判断怎么加比例，我用fermentas的连接酶，一般30min中就ok了，3.1插入过4k片段也ok。

还有需要注意一点，你做酶切的时候有些酶是有星活性的，需要注意下酶切时间，保证酶切正确。

其实不用分析太多原因，严格每步都质控好，重复一次就ok了！希望有帮助。
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11楼2013-10-31 10:29:08
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