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科学先生

银虫 (正式写手)

[求助] 求熟知 金棒的暗场成像 的各位专家各路大神！！！

吸收大概在800nm左右的金棒被A549细胞摄取后拍暗场成像，发现拍出来的暗场图片中的点（金棒）是浅蓝色（文献中大部分800nm左右吸收的金棒都是要么是绿色（显示520nm处的散射光）要么是白色），该怎么解释啊？？？这个散射光的颜色跟金棒的吸收波长有没有直接关系啊？  是不是只要看细胞里面的那些点就行了，到底有没有必要提这个颜色啊？      还有金上包裹聚合物和硅的话，对金棒的散射光有没有影响？？  具体看图啊                            帮我解释下啊!!!

[ Last edited by congqin312 on 2013-10-25 at 11:48 ]
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1楼2013-10-25 10:52:12
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supernatural

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
金球的散射光是绿色的，至于金棒，它有两个散射峰，短波长处的显示绿色散射光，长波长处的显示红色散射光，当红色散射光的峰进入近红外或者红外后（吸收到了800左右了，散射光应该就进入近红外了）便不再显示，此时金棒显示绿色
金上包裹聚合物和硅的话，对金棒的散射光有影响，相当于纳米粒子周围的折光指数增大，散射光颜色会发生红移
但是我也解释不了为什么楼主的会是蓝色散射光
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人生仿佛像一棵大树，需要风雨的洗礼才能茁壮成熟。
2楼2013-10-25 11:33:17
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科学先生

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by supernatural at 2013-10-25 11:33:17
金球的散射光是绿色的，至于金棒，它有两个散射峰，短波长处的显示绿色散射光，长波长处的显示红色散射光，当红色散射光的峰进入近红外或者红外后（吸收到了800左右了，散射光应该就进入近红外了）便不再显示，此时 ...

有没有可能是暗场本身拍摄过程中造成的，暗场和明场一样其实也可以调白平衡，调的话颜色就会不一样，有没有可能是这个原因啊 ？
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3楼2013-10-26 21:40:35
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supernatural

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3楼: Originally posted by 科学先生 at 2013-10-26 21:40:35
有没有可能是暗场本身拍摄过程中造成的，暗场和明场一样其实也可以调白平衡，调的话颜色就会不一样，有没有可能是这个原因啊 ？...

暗场在拍摄的时候可以调节，调到最清楚为止，因为很多纳米粒子在调节曝光时间以后或者焦没调好的话会显示绿色或者其他颜色。还有一个因素，那就是需要调节R G B值，使眼色与肉眼看到的尽量一致，曝光时间一类的也需要调节，还有使用的物镜的放大倍数问题，这些都是需要调节一下的，如果楼主把所有参数都调好了，还是显示蓝色，才能说明你的金棒真的是散蓝色光
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4楼2013-10-26 23:23:43
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科学先生

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by supernatural at 2013-10-26 23:23:43
暗场在拍摄的时候可以调节，调到最清楚为止，因为很多纳米粒子在调节曝光时间以后或者焦没调好的话会显示绿色或者其他颜色。还有一个因素，那就是需要调节R G B值，使眼色与肉眼看到的尽量一致，曝光时间一类的也需 ...

对，我用40倍放大的时候，材料拍出来的颜色就是黄绿色的，但是，看的不清楚太模糊了，所以拍的是放大20倍的，拍出来的颜色就不一样了，曝光时间还好，对焦的话就是当细胞立体感比较强一些的时候材料对焦就不好对就比较模糊，RGB值我没怎么调诶，好像没有这个按钮。我是先拍明场，并且把明场的白平衡调好以后，直接切换暗场器件，拍的暗场。拍出来的是这种显蓝色的，其实我觉得就是背景的那种浅蓝色造成的干扰，但是点还是看的很清楚的。你说我这个该怎么解释呢，我现在就是不知道怎么解释..........你能不能帮我说个合理的靠谱的解释啊？？
(PS:拍摄的放大倍数对拍出来的颜色也有影响吗？)
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5楼2013-10-27 20:57:11
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supernatural

荣誉版主 (文坛精英)

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by 科学先生 at 2013-10-27 20:57:11
对，我用40倍放大的时候，材料拍出来的颜色就是黄绿色的，但是，看的不清楚太模糊了，所以拍的是放大20倍的，拍出来的颜色就不一样了，曝光时间还好，对焦的话就是当细胞立体感比较强一些的时候材料对焦就不好对就 ...

R G B值是在软件那里，调到与肉眼从镜头上看到的一致为止
我没有拍过明场，不懂那个白平衡。如果真的是蓝色，我可以想到的可能性有以下几个：一.玻片没洗干净，表面杂质呈现蓝色。二.你的细胞自身会散射蓝色光。三.你的金棒确实是散蓝色光（这个可能性我觉得不大）
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6楼2013-10-27 22:08:40
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派大星星星儿

新虫 (小有名气)
请问楼主，如何将正电的金棒吸附在玻璃片上进行暗场成像呀？
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7楼2018-12-08 10:03:00
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