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woshihaokkk

新虫 (初入文坛)

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[求助] 关于mRNA颈环结构影响结合活性的问题

敢问各位研神，mRNA3'UTR区段的microRNA结合位点形成了颈环结构，这样是否会导致二者结合变弱，调控能力低下？我荧光素酶检测和定量结果差异很大，故此求助。万谢百拜。

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1楼 2013-10-23 22:40:28

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David勇

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【答案】应助回帖

★ ★
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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-10-24 17:43:33

你确定是形成了颈环结构？如果是当然会有影响的。但是为什么不接到载体上就不会有颈环结构？荧光素酶检测室双转染的，好定量结果有差异是应该的，但是总体趋势是不变的啊。你荧光的内参校正没问题吧？

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2楼2013-10-24 09:41:42

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woshihaokkk

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引用回帖:

2楼: Originally posted by David勇 at 2013-10-24 09:41:42
你确定是形成了颈环结构？如果是当然会有影响的。但是为什么不接到载体上就不会有颈环结构？荧光素酶检测室双转染的，好定量结果有差异是应该的，但是总体趋势是不变的啊。你荧光的内参校正没问题吧？

通过软件预测看到的颈环结构，接到的载体是PSICHECK2，内参是和测定UTR在同一载体的，而且重复了3次以上了，都这样，我就猜到是颈环结构影响。至于为啥不接到载体上就不会有颈环影响，我真心不懂啊，所以特此求助。

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3楼2013-10-24 10:22:40

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David勇

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woshihaokkk: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-07 16:07:17

引用回帖:

3楼: Originally posted by woshihaokkk at 2013-10-24 10:22:40
通过软件预测看到的颈环结构，接到的载体是PSICHECK2，内参是和测定UTR在同一载体的，而且重复了3次以上了，都这样，我就猜到是颈环结构影响。至于为啥不接到载体上就不会有颈环影响，我真心不懂啊，所以特此求助。...

miR和Psicheck2是同时转染还是先后。先转miR效果会明显点。

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4楼2013-10-24 16:36:34

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