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荧光法测量药物与蛋白结合实验的重复性问题
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刚刚接触荧光猝灭实验的菜鸟,在实验中发现,两次独立的重复实验之间的数据差距很大,用F0/F~[D]作图,得到Stern-Volmer线性都是不错的,但是得到的速率常数相差很大,之后的Scatchard方程计算结合常数也是差着数量级,这是怎么回事呢? 还有,在结合常数计算时,有Scatchard方程,就是双对数方程,和修正的Stern-Volmer方程两种拟合方法,选择哪种较好呢?我感觉修正的Stern-Volmer方程因为是F_0⁄∆F对1/[D],经常出现数据点过于集中密集的情况,好像不利于线性拟合。 外行初学虚心求教达人。 |
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