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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 铺板时细胞数目多少会影响最终凋亡实验结果吗？
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YOUNG11

新虫 (小有名气)

[求助] 铺板时细胞数目多少会影响最终凋亡实验结果吗？

做细胞凋亡双染实验，发现一个问题，6孔板中，铺1*105 和2*105个细胞，给药后测出来的凋亡率差别很大，10万个细胞的凋亡率大概在50%，20万个的是20%。药物浓度都是一样的，有高手遇到过类似的情况吗？那我应该选择哪个细胞浓度铺板呢？
还请高手不吝赐教，不胜感激
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1楼 2013-10-16 17:21:37
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nagasaki

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+1 2013-10-17 08:36:21
我觉得现在前者密度细胞好，
如果可能，可以降低细胞密度

请大家指正
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希望和同行有更多的交流机会！
2楼2013-10-17 01:13:35
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YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nagasaki at 2013-10-17 01:13:35
我觉得现在前者密度细胞好，
如果可能，可以降低细胞密度

请大家指正

那如果铺10万个细胞的话，会不会最后药物作用太厉害，导致细胞数太少，影响测定呢？
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3楼2013-10-17 08:38:04
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+2 2013-10-17 09:10:35
1。一般密度大的相对环境更稳定，抗逆性更强。2.死了同样比例的话，密度大的长得快，把数量补上了。3.一般细胞80~90%贴壁时状态最好，低于这个比例要脆弱很多。
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4楼2013-10-17 08:46:38
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
YOUNG11: 金币+2 2013-10-17 09:10:44
我觉得细胞数量和药物浓度，在前期做MTT实验，或者细胞生长曲线时就可以确定。很明显，药物浓度相同的情况下，细胞数量多少，会很大的影响实验结果。所以建议使用摸索好的细胞数量对应药物浓度。
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5楼2013-10-17 08:58:50
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YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by daibingling at 2013-10-17 08:58:50
我觉得细胞数量和药物浓度，在前期做MTT实验，或者细胞生长曲线时就可以确定。很明显，药物浓度相同的情况下，细胞数量多少，会很大的影响实验结果。所以建议使用摸索好的细胞数量对应药物浓度。

做MTT用的是96孔板，做凋亡用的是6孔板，怎样控制二者细胞密度一致？通过孔的面积换算吗？
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6楼2013-10-17 09:12:29
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YOUNG11

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hl16010921 at 2013-10-17 08:46:38
1。一般密度大的相对环境更稳定，抗逆性更强。2.死了同样比例的话，密度大的长得快，把数量补上了。3.一般细胞80~90%贴壁时状态最好，低于这个比例要脆弱很多。

多谢，我再调整一下细胞密度吧
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7楼2013-10-17 09:15:00
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daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by YOUNG11 at 2013-10-17 09:12:29
做MTT用的是96孔板，做凋亡用的是6孔板，怎样控制二者细胞密度一致？通过孔的面积换算吗？...

孔面积不一样，但密度可以一样啊，
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8楼2013-10-17 10:03:12
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